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什么是细胞转染技术?盘点细胞转染的原理及其的特点

发表时间:2023-03-08 访问次数:353

  细胞转染技术在蛋白抗体制备的一种常用方法,而且随着技术的不断发展,细胞转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常用工具。而且在基因功能、基因调控等方面有着广泛的使用。那么,具体什么是细胞转染技术?它的原理和特点都有哪些呢?今天普健生物就和大家具体聊聊。

  什么是细胞转染技术?

  所谓的细胞转染,其实就是将外源分子导入到真核细胞内,通过这些外源细胞来该表真核细胞内蛋白表达能力的一种技术。

  使用细胞转染技术的目的是什么?

  细胞转染的主要目的就是研究基因的功能和基因的产物,对细胞中的一些表达进行抑制或增强,控制细胞内蛋白产生。

  转染为什么分为瞬时转染和稳定转染?

  所谓的瞬时转染和稳定转染的主要区别其实就是其是否需要将外源核酸整合到宿主染色体上;

  瞬时转染:不用将外源基因整合到宿主染色体中,通常这个情况只维持几天,多用于启动子和其他调控元件的分析;

  稳定转染:将外源基因整合到宿主染色体中,也可以作为一种游离体存在,通过一些选择标记,从而得到稳定转染的同源细胞系;

  那么,有哪些转染方法及其应用呢?

  1、磷酸钙法。通过磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜,通过细胞内吞,实现转染。但是不适合用于原代细胞,虽然操作简便,但是重复性差;

  2、电穿孔法。通过高脉冲电压破坏细胞膜电位,使得DNA通过膜小孔进入。但是容易造成细胞死亡,DNA和细胞用量大,而且需要根据不同细胞的类型进行电穿孔实验;

  3、阳离子脂质体法。通过将带正点的脂质体与核酸带浮点的磷酸基团形成的复合物形成细胞内吞。这个方法适用性较广,重复性好,但是转染的时候需要去除血清,且转染后细胞类型变化较大;

  4、病毒介导法。通过侵染宿主的病毒将外源基因整合到染色体中。对于那些难转染的细胞来说,这个方法非常合适,但是所携带的基因不宜太大,且细胞需处于分裂期;

  5、基因枪法。通过重金属吸附DNA,将其用弹道射入细胞,使得其随着DNA在细胞内释放、表达。使用范围相对来说较广;