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有没有什么办法可以解决蛋白可溶性不高的问题?

发表时间:2023-05-19 访问次数:540

  我们在进行蛋白表达时,往往会涉及到一个概念:蛋白可溶性。它的意思是说,蛋白可溶于溶液中的分量。我们知道,蛋白只有溶于溶液中时才会发生作用,析出的蛋白则无法发生反应,所以,蛋白的可溶性在极大程度上制约着蛋白的功能。那么,有没有什么办法来提升蛋白的可溶性呢?今天,普健生物就和大家具体聊聊。

  1、选择可溶性更高的工程菌

  蛋白是否可溶,在很大程度上取决于其二硫键以及是否能够正确折叠的问题。所以,我们可以选择那些有利于二硫键形成的宿主菌,这样更有利于蛋白的表达;

  2、添加一些促溶的标签

  根据蛋白的特性,有意识地加入一些能够促进蛋白可溶性的标签;

  3、伴侣表达

  在进行工程菌表达时,可以同时加入一个能够表达伴侣蛋白的质粒,这个伴侣蛋白不能与表达外源蛋白的质粒出现质粒不相容的情况。然后,在结合实际情况来确定表达伴侣蛋白的质粒;

  4、选择合适的启动子

  蛋白可溶性的强弱也和启动子的选择有着极大的关系,强启动子不仅能提升蛋白产量,同时也增强了包涵体的形成,从而提升蛋白的可溶性;

  5、优化蛋白的培养条件

  通过优化蛋白的表达环境,比如:诱导温度、诱导剂浓度、诱导时间等,同时还可以通过优化培养基内的营养物质等来提升蛋白的表达;

  对于不同的公司来说,提升表达蛋白可溶性方法有很多,而且各不相同,但是,这些方法都是在实验过程中不断总结所得,能够应对绝大部分蛋白表达的问题。自然了,蛋白表达经验越多的公司,其应对蛋白表达问题的方法也越多,也越好。普健生物作为一家拥有10余年蛋白抗体定制表达经验的公司,专业为你听蛋白表达服务,如果您有需求,欢迎来电咨询。