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五大蛋白表达系统之一的大肠杆菌表达系统有哪些特点?

发表时间:2023-05-31 访问次数:725

  大肠杆菌表达系统作为五大蛋白表达系统之一,因为其使用最早、遗传背景清晰等特点,使得其即便在表达系统越来越多的今天,依然是主要的工具。因为大肠杆菌增殖时间较短,表达起来非常的快捷,一般的重组蛋白在大肠杆菌中一周之内就能表达成功。那么,大肠杆菌表达系统还有什么其他特点呢?今天普健生物就和大家具体聊聊。

  1、可形成包涵体

  一般来说,非真核生物表达的蛋白都不会形成包涵体,但是,大肠杆菌这类的过表达原核生物会形成包涵体,而且在大肠杆菌中,蛋白修饰后翻译、折叠的效率要比真核细胞高10倍以上,从而促进包涵体的形成。

  包涵体会在极大程度上影响可溶性活性蛋白的产生,但也因为如此,使得其不易被蛋白酶降解,从而减少被其他蛋白污染的发生。当然了,通过一定的手段,也可以将包涵体再折叠成可溶性蛋白;

  2、通过温度来减少包涵体的形成

  将温度保持在15-30度之间,能够形成更多可溶性蛋白的同时,尽可能少地形成包涵体。据研究显示,这个区间的温度可能会在一定程度上降低蛋白的转率、折叠的效率,从而促进蛋白的正确折叠。而且这个温度下,能够有效降低蛋白酶的活性,更大可能性地保持蛋白活性;

  3、可添加融合标签提高重组蛋白可溶性

  和其他重组蛋白表达方式一样,在大肠杆菌表达系统中,我们可以适当地加入一些融合标签来促进蛋白的可溶性。同时,可以通过精确地对融合标签进行切除、融合等手段,有效控制蛋白的制备;

  4、形成二硫键

  一般来说,大肠杆菌因为有二硫键氧化还原酶的催化作用,使得其为大肠杆菌表达系统二硫键唯一形成的场所。所以,我们可以通过多大肠杆菌的基因组进行修改,从而在细胞质内形成一个更好的二硫键形成环境;

  5、可翻译后修饰

  相对其他表达系统来说,大肠杆菌对蛋白翻译后修饰的能力有限,需要有针对性地进行优化;

  所以,对于一个表达系统而言,其表达的蛋白是否高质量,更多程度上取决于蛋白本身特性,只有针对相对合适的表达系统,才能实现高表达、高质量的蛋白产品,因为对于一个表达系统来说,其一定存在优势和不足之处。所以,如果想要实现蛋白的高质量表达,合适的表达系统选择是首要的。普健生物专业为广大用户提供大肠杆菌蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。