蛋白纯化实验中出现沉淀的原因分析

　　在蛋白制备实验过程中，蛋白纯化可以说是一个非常重要的问题，只有将蛋白纯化到一定浓度后，蛋白的作用才会更强，实验的才能更好达到我们想要的效果。但是，在实验中我们常常会遇到各种各样的问题，比如蛋白沉淀，就是非常常见的问题之一。那么，到底是什么原因导致蛋白沉淀的呢?今天普健生物就和大家具体分析分析。

　　如果完全按照实验设计过程而来的话，一般都不会出现沉淀的情况，如果发生沉淀，那么就一定是外部环境发生了变化。

　　1、PH值变化。理论上来说，蛋白有一个等电点，当PH值在蛋白等电点附近的时候，就会出现蛋白沉淀的现象;

　　2、浓度过高。日常实验中，我们配置的溶液环境不一定符合蛋白的生存环境，除了温度和PH值外，最主要的就是盐离子浓度。如果盐离子浓度过高的话，就会出现盐析现象，最终造成蛋白沉淀;

　　3、重金属脱落。在对蛋白进行Ni纯化处理时，其中的一些镍离子会脱落，而这些脱落的重金属则会造成蛋白的沉积，最终造成沉淀现象;

　　4、冻融次数过多。对蛋白进行反复冻融会在一定程度上伤害蛋白，对离子和缓冲液造成影响;

　　5、滋生细菌。如果将蛋白长时间放置在4度的环境下，则容易滋生细菌，自然会造成蛋白沉淀;

　　总的来说，造成蛋白的原因都是一些细节方面的操作问题，如果我们在实验中严格按照实验步骤，并且时刻关注溶液的PH值、温度、浓度，同时尽量做到尽快使用，避免反复冻融，这样，就能从根本上减少蛋白纯化中沉淀情况的发生。武汉普健生物专业为广大用户提供蛋白纯化服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。