蛋白纯化是一种常用于提升蛋白纯度的方法,它能够提升蛋白的特性,让实验更加成功。蛋白纯化的方法有几种,其中较为常用的就是亲和层析法。在这里,普健生物和大家具体聊聊有关亲和层析蛋白的原理及其优缺点。
亲和层析纯化的步骤:
1、捕获
通过速度和容量之间进行优化组合,能够让产物能够进行有效地分离、浓缩和稳定化处理。如果样品带标签,可以选择亲和层析,如果不带标签,可以考虑离子交换;
2、中度纯化
这个过程主要用于将目标和大体积的杂质分开。在这个阶段,速度不再是最重要的因素,一般考虑采用离子交换层析或疏水层析进行进一步样品提纯;
3、精细纯化
在这个过程中,主要用于提升高分辨率。因为已经去除了大部分的杂质,但是也可能造成一定的损失,这个时候,一般考虑使用高分辨率的分子筛或高分辨率的离子交换层析柱来进行纯化;
亲和层析的优缺点:
1、这个方法非常有效,经过一步步地手段,能够提纯蛋白质,然后将蛋白分离出来,而且纯度非常的高;
2、这个方法能够对分子进行选择化分离,能够提升纯化倍数。经过纯化后的蛋白性质更加稳定,能够有效提升其活性回收率。而且能够有效减少纯化步骤,缩短纯化时间;
3、但是,这个方法载体比较昂贵,机械强度低,而且所用配给需要首先进行纯化,各种成本相对较高;
虽然说,蛋白纯化的方法有好几种,但是对于不同的使用环境来说,各个方法都有各自的优势。而且,随着蛋白纯化技术的不断提升,相信未来能够有更合适的方法来应对各种不同的纯化需求。普健生物专业为广大用户提供蛋白纯化服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。