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非洲猪瘟(Africanswinefever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)感染猪而引起的一种急性、烈性传染病，死亡率可达100%，已被世界动物卫生组织(WorldOrganizationforAnimalHealth,WOAH)列为法定报告动物疫病。目前尚无有效药物和疫苗用于治疗和预防ASF，主要通过临床诊断和扑杀感染动物来控制疫情传播。建立快速、精准和高效的诊断方法对于疫病防控至关重要。当前，国内外ASF相关诊断技术主要包括传统病原学诊断技术、新型病原学诊断技术以及血清学诊断技术等。
传统病原学诊断技术
利用病原学诊断技术能够在ASF疫情早期检测出动物体内是否携带病毒。传统病原学诊断技术主要包括病毒分离实验和红细胞吸附实验(haemadsorption，HAD)。与血清学检测方法相比，病原学检测结果可以直接判断是否感染病毒。此外，病毒核酸检测包括聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)和实时荧光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)等方法，具有灵敏度高的特点。传统病原学诊断技术在ASF的早期诊断和流行病学调查中发挥了重要作用，可降低病毒传播风险，从而预防ASF的大规模传播流行，减少ASF暴发导致的经济损失。
新型病原学诊断技术
随着对ASFV的深入研究和分子生物学技术的发展，一系列新型核酸诊断技术逐渐被开发，如微滴数字PCR(dropletdigitalpolymerasechainreaction,ddPCR)检测技术、LAMP技术、重组酶聚合酶扩增(recombinasepolymeraseamplification,RPA)技术和以CRISPR/Cas(clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats/CRISPR-associatedproteinssystem)为基础的检测技术等，这些新型诊断技术为ASF的精确诊断和有效防控提供了更加全面的支持。
血清学诊断技术
血清学诊断是基于抗原抗体反应来诊断和监测是否存在病毒感染。WOAH推荐的ASF血清学检测方法包括酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)、间接免疫荧光实验(indirectimmunofluorescenceassay,IFA)、间接免疫过氧化物酶实验(indirectimmunoperoxidasetest,IPT)及免疫层析实验等。血清学检测可以用于猪群疫病状态的定期监测，能够发现病毒的慢性感染，有利于控制潜在疫情的发生和扩散。
目前，ASF检测技术主要包括病原学与血清学检测方法，每种方法各有其优缺点。在ASF病原学检测方面，PCR和qPCR检测灵敏性高，但其检测结果易出现假阳性；LAMP和RPA等无需专业设备，但对人员和工作环境要求高，易造成气溶胶污染；ddPCR具有高敏性和特异性，但昂贵的实验设备限制了其临床应用;利用CRISPR/Cas系统进行检测的技术仍然处于初步研发阶段，尚未有商品化的产品。近期流行病学调查发现了较低毒力的ASFV毒株，能够引起慢性或持续性感染，临床检测可能会出现病毒核酸检测阴性但抗体检测阳性的情况，给ASF病原学诊断带来了很大的挑战。
参考文献
ZHANG Yuan-yuan, JIN Jia-xin, ZHAO Xu-yang, ZHANG Shuai, LIU Yue-yue, LI Xiang-lin, SUN Ai-jun, LIN Shu-qian, ZHUANG Guo-qing. Research Progress of Novel Diagnostic Methods of African Swine Fever. Journal of Chinese Biotechnology, 2023, 43(10): 62-71 doi:10.13523/j.cb.2305012
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