杂交瘤技术制备抗体的相关原理和详细步骤

　　在单克隆抗体制备的方法中，杂交瘤技术的使用是非常频繁的。杂交瘤技术是在体细胞融合技术上发展起来的一种技术，它通过将免疫动物细胞的脾细胞与骨髓瘤细胞相融合，所得细胞不仅能够实现体外连续传代，更是能持续性制备抗体。

　　杂交瘤技术的原理：

　　杂交瘤技术的基本原理是通过将两种细胞融合，让融合所得的细胞能够同时拥有两者的特征。而我们常说的杂交瘤抗体制备技术是通过将经过免疫的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞，所得细胞既具备抗体分泌功能，更是能够实现体外连续培养，具备所谓的永久性。

　　杂交瘤技术的步骤：

　　1、选择合适的细胞并进行融合

　　我们知道，脾脏是B细胞聚集的重要场所，也就是说，只要我们对机体进行刺激，在脾脏内都会出现明显的抗体应答。所以，我们可以通过在脾脏中提取免疫应答后的B细胞，并将其与骨髓瘤细胞相融合，而后加入细胞融合剂促使两种细胞相融合;

　　2、选择合适的培养基

　　细胞的融合是一个随机的过程，融合后的细胞可能是脾细胞与脾细胞、脾细胞与B细胞、B细胞与B细胞、未融合的脾细胞、未融合的B细胞以及细胞的多聚体等。结合细胞融合所需的营养选择合适的培养基，通过5-7天的培养后，多聚体和未融合的细胞会自动筛除。而后，我们再将融合后的杂交瘤细胞筛选出来即可;

　　3、细胞筛选及稀释

　　细胞的筛选主要分为两步来进行，第一步是融合细胞的筛选，将成功融合的细胞从混合物种筛选出来。第二步是特异性筛选，将能够产生我们所需抗体的细胞进行特异性筛选;

　　而后，将筛选出来的融合细胞进行充分稀释，并分配到培养板上，保证每个空中至少有数个细胞(这一过程也被称为克隆化)。而后，在将这些阳细胞进行再次克隆化，然后再利用其特异性筛选出合适的细胞。而后对所得细胞进行增殖、冻存;

　　杂交瘤细胞技术作为单克隆抗体制备的重要手段，所得抗体无论在质量还是数量上都有着极大的优势。虽然说随着技术的不断发展，各种全新的技术也应运而生，但是杂交瘤细胞技术依然是现阶段使用非常广泛的方式之一，而且随着技术的不断完善，相信未来的使用会变得更加的广泛。武汉普健生物专业为广大用户提供单克隆抗体制备服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。