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盘点SPR亲和力检测时常见的几大问题

发表时间:2024-02-29 访问次数:112

  SPR(Surface plasmon resonance)也被称为表面等离子体共振,就本质上来说,是一种物理光学现象。SPR技术可用于进行分子间特异性结合的分析、浓度定量、结合动力学、亲和力分析等,使用范围非常的广泛。

SPR兔单克隆抗体

  在SPR亲和力检测时,有很多问题需要引起注意,这样才能在更大程度上保障实验的精准。下面,普健生物和大家盘点这些问题。

  1、如果为病毒样本,需要进行仪器消毒吗?

  无论使用的是不是病毒样本,在每次检测完成后,都需要对一起进行清洗,清除管道中残留的样品,尽可能清洗除菌,以防止管道中微生物可能对仪器造成的损坏;

  2、进行亲和力分析的时候,一般选择哪种缓冲液?

  亲和力检测时我们通常采用的缓冲液为PBS或HBS。当然了,对于一些特殊的检测需求来说,需要搭配特定的缓冲液;

  3、如果样本为小分子化合物,可以做亲和力检测吗?

  小分子化合物(ATAGENIX)一般来说可以做亲和力检测,但是常常需要根据小分子本身的溶解性来进行判断,如果溶解度低,需要加入DMSO来促进溶解;

  4、检测过程中出现非特异性结合,需要如何解决?

  当抗原和抗体发生非特异性结合时,我们需要对样品离心后放弃上清液,加入PBS清洗三次后,过滤掉聚集的细胞,而后加入醋酸钠,并将其稀释到合适的细胞密度;

  5、如何进行表位分析?

  选择配对检测,通过在芯片表面固定一种抗体,并将抗原结合到抗体上,在其经过第二种抗体时,看其是否能够结合到抗原上;

  6、SPR和BLI的优缺点各有哪些?

  SPR和BLI在亲和力检测中各具优势,两种方法都可以获得精准的数值和相关动力学数据。当然了,SPR比BLI拥有更长的历史,在灵敏度上更具优势,在分辨方面更胜一筹。只是SPR需要更多的仪器维护,且实验样品不可回收;

  亲和力检测作为现阶段常用的亲和力检测手段,无论在理论研究和还是临床实验上,都有着广泛的应用。普健生物专业为广大用户提供SPR亲和力检测服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。