为什么在进行稳定细胞株构建时会这么困难?

　　稳定细胞株是一种用于大量且稳定表达蛋白的一种方式，不仅可以表达蛋白，而且还能进行相关药物筛选以及基因表达，使用范围非常的广泛。但是，对于很多企业来说，都不会选择通过构建稳定细胞株来表达蛋白，因为对于他们来说，稳定细胞株构建非常的困难，性价比相对较低。为什么稳定细胞株构建这么困难呢?下面，普健生物和大家具体聊聊。

　　我们知道，外源基因的表达主要采用两种方式，一种是瞬时表达，另外一种是稳定表达。

　　瞬时表达：将外源DNA克隆到质粒中，而非将其整合到宿主细胞的染色体中。瞬时表达能够迅速实现蛋白的表达，但是也只能持续几天。瞬时表达的稳定性相对较差，而且在不同实验中差异性较大，且无法长久;

　　稳定表达：直接将外源DNA整合到宿主细胞的染色体中，通过细胞筛选的方式，实现宿主细胞长期表达目的蛋白的方式;

　　但是，问题出现了。想要将外源基因整合到宿主细胞的染色体中相对困难，成功率非常的低，通常会发生随机整合，表达水平会受到整合位置、周围染色体原件等因素的影响。所以，如果我们想要获得能够进行稳定表达，则需要进行大量的筛选工作。

　　什么情况下需要构建稳定细胞株?

　　1、对于那些需要长期研究的目标细胞来说，可以通过构建稳定细胞株来实现;

　　2、对于一些半衰期极长，尽可以通过RNA干扰却无法表达的蛋白，只有通过稳定细胞株来实现;

　　3、对于那些无法进行精确表达的细胞;

　　4、需要用到细胞的;

　　稳定细胞株的构建要点有哪些?

　　稳定细胞株构建是一个长期的过程，所以，从质粒构建、病毒包装、细胞感染以到细胞筛选等过程，都需要引起注意，因为任何一个细节方面的错误都可能造成耗时大半年的项目付诸流水。

　　稳定细胞株构建能够在极大程度上解决蛋白稳定表达的问题，对于一些需要长期制备或者需要进行细胞的长期研究时，都可以通过稳定细胞株来解决。当然了，对于稳定细胞株的构建，除了需要相关技术支持外，还需要有精细且细节方面的操作，只有在各个方面做好了，才能在更大程度上保证其构建成功。普健生物专业为广大用户提供稳定细胞株构建服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。