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盘点SPR抗体亲和力成熟的几种常用策略

发表时间:2023-01-17 访问次数:788

  抗体亲和力成熟的概念在我们进行相关抗体制备的过程中常常会用到,这个技术能在一定程度上解决抗体质量方面的问题,也能提升表达的效率。而想要实现抗体亲和力成熟,必须对天然抗体有充分的了解,同时知道其体内成熟的原理,然后通过模拟天外可能出现和存在的一些变化,从而通过相关条件来促进抗体的体外成熟。

  对于天然抗体来说,亲和力成熟一般分为体细胞高频突变和克隆选择两个过程,想要抗体出现亲和力成熟,抗原的刺激起着至关重要的作用。所以,我们在进行体外抗体亲和力成熟时,也常常会利用到相关策略。下面,普健生物就和大家具体聊聊有关抗体体外亲和力成熟的几个策略。

  策略一:随机突变

  1、错配PCR。通过改变PCR的反应条件,从而提升核酸发生错配的几率,最终将随机突变引入到基因序列中;

  2、DNA改组。通过对抗体基因进行脱氧核酸酶I切片,随后在进行PCR扩增,从而完成抗体基因的突变;

  3、链改组。也叫链天技术,其中一条轻重链不变,但是对另外一条轻重链进行重组和配对,从而提升抗体亲和力(通常会将噬菌体展示技术与此技术结合使用);

  策略二:定向引入

  也叫CDR重组。在抗体亲和力成熟的过程中,细胞内的高频突变区并非均匀分布,而是主要集中在直接接触的部位。因此,这样既能获得足够多的突变多样性,又不会破坏蛋白质的结构。所以,我们可以通过在CDR区引入多个抗体,再通过抗体库进行CDR区的多次重组,这样就能达到亲和力成熟的目的;

  所谓的抗体亲和力成熟的过程,其实就是一个体外分子进化、多样化和扩增的过程,这个过程能够得到高亲和力的抗体,使得低剂量药剂要过增强的作用。抗体亲和力成熟,能增加治疗效果,减少各种毒副作用,在抗体药物研发过程中有着至关重要的作用。普健生物专业为广大用户提供SPR抗体检测服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。