稳定细胞株构建的常用流程及其优势盘点

　　在生物技术研究(抗体药物开发、蛋白研究等)中，常常需要使用到稳定细胞株的构建来提升蛋白高亲和力和批次一致性。采用稳定细胞株构建能够提供可靠的平台，更是在生物制药和基因治疗等领域有着广泛的使用。下面，普健生物具体和大家详细介绍稳定细胞株的构建。

　　那么，什么是稳定细胞株呢?稳定细胞株就是通过基因工程将外源基因引入到宿主细胞中，然后通过培养、筛选等重复操作，筛选出能够重复制备目标蛋白的细胞群体。

　　在稳定细胞株构建的过程中，有两项核心步骤需要特别注意，分别是宿主细胞的选择以及表达载体的构建，只有做好了这两方面的工作，才能更好地进行细胞株的构建。

　　宿主细胞的选择：常用的宿主细胞较多，比如CHO细胞、HEK细胞等，需要结合宿主细胞的生长特性、表达水平以及生产成本等综合考虑;

　　表达载体的构建：其实就是将目标基因导入到宿主细胞中的过程。常见的表达载体主要包含目标基因、选择基因、调控原件等，主要目的就是确保目的基因的稳定表达;

　　稳定细胞株构建的方法主要有两种：质粒稳定细胞系以及基因整合稳定细胞系。

　　质粒稳定细胞株构建的流程如下：

　　1、宿主选择。选择合适的宿主来进行进一步的细胞株构建;

　　2、载体构建。通过质粒来构建载体;

　　3、细胞转染。将构建好的质粒转染到宿主细胞内;

　　4、细胞株筛选。通过培养及筛选，重复操作多次后，筛选出合适的细胞株;

　　基因组整合稳定细胞株构建的流程如下：

　　1、选择合适的细胞株。选择出合适的细胞作为宿主;

　　2、构建合适的载体。整合载体，将目标基因整合到宿主中;

　　3、细胞转染。将构建出来的载体导入到宿主细胞中;

　　4、筛选细胞系。通过标记基因进行细胞系的筛选和扩增;

　　稳定细胞株的优势：

　　1、实现持久表达。稳定细胞株能够长久且稳定地表达目标蛋白;

　　2、更高的可控性。可以通过调控原件来时间对目的基因的调控;

　　3、实现大规模生产。适合用于大规模生产;

　　稳定细胞株的构建在生物研究以及应用上有着广泛的应用，因为其能够实现持久性表达，而且能够实现大规模生产，使得其得到非常广泛的使用。当然了，因为其技术要求较高，而且制备周期非常的长，所以，对于一些蛋白制备续期来说，不适合使用。武汉普健生物专业为广大用户提供稳定细胞株构建服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。