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哺乳动物细胞表达系统

服务简介

1.载体构建

(1)可将cDNA克隆至客户或者普健生物提供的哺乳细胞的表达载体中

(2)可在表达载体中添加分泌信号肽和纯化标签,促进蛋白分泌表达及满足一步亲和纯化的需求

(3)能生产并鉴定高效稳定细胞系,适合大规模发酵生产

2.稳定基因表达符合长期生产需求,整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产

3.瞬时表达(TGE)

(1)与稳定基因表达相比,TGE主要适用于短期内制备重组蛋白,一般在10天内即可快速转染,无需质粒DNA的遗传性选择

(2)普健生物的瞬时表达使用悬浮细胞,能够完成毫升到100L的体积的蛋白表达

4.工艺过程开发及扩大规模。普健生物能够优化表达过程以及表达产物,预测细胞表达量,摸索发酵罐发酵条件,适合大规模发酵生产

5.纯化:普健生物拥有完善的蛋白纯化系统,亲和纯化,凝胶过滤,离子交换及疏水层析等纯化方法,能够完成各类型蛋白的纯化,以及纯化工艺的摸索

普健生物提供表达载体构建、瞬时转染、表达测试及大规模动物细胞发酵和蛋白纯化等一站式蛋白技术服务。

表达方式

细胞

瞬时表达

HEK293,HEK293细胞来源于293细胞系,采用无血清悬浮培养CHO-S,CHO-S细胞是来自中国仓鼠卵巢细胞的克隆分离株,被驯化为无血清悬浮培养

稳定表达

CHO-K1,CHO-K1由CHO衍生而来,该细胞株培养条件简单、贴壁强度适中,比较容易转染

稳定细胞株构建

DG44,DG44 细胞(二氢叶酸还原酶缺陷型 , DHFR-)由中国仓鼠卵巢(CHO)细胞衍生而来,常用于构建适合重组蛋白生产的细胞系。DG44细胞筛选和共扩增标记是DHFR基因(dhfr)

    表达载体:pcDNA3.1, pIRES, pTT3, pCEP4,pATX1等

服务优势

经验丰富:团队具有十多年丰富的蛋白表达经验,累计完成5000+哺乳表达项目,200+稳转细胞株构建项目

可提供多种表达服务: 瞬时转染表达,重组抗体表达生产,稳定细胞株构建服务

1.瞬时转染表达:无血清悬浮培养的多种哺乳细胞表达系统,自主研发高产表达体系,大幅度提高表达量(3-6倍),同时提供商业化转染体系为广大客户提供多种选择

2.重组抗体表达:拥有一套经过反复验证的载体-细胞-转染高效表达体系,轻松获得抗体的稳定性克级生产

3.稳定细胞株构建:拥有的自主知识产权的CHO-K1改造细胞系可提供蛋白及抗体药物研发生产服务

4.十万级洁净细胞房:可提供<0.1EU/ml级别的低内毒蛋白表达服务/产品

5.大规模生产:无血清悬浮细胞培养每批次200L+生产

6.一站式服务:基因优化、蛋白结构分析与表达方案设计,瞬时转染,稳定细胞株构建,重组抗体生产、数据分析

服务内容

服务项目

客户提供

服务内容

服务周期

交付内容

哺乳动物细胞表达系统

基因序列

载体

基因合成

2-3周

基因合成报告

表达及纯化测试

2周

提供表达及纯化测试报告

1L表达及纯化

2周

提供蛋白样品及报告

摇瓶或发酵罐放大

2-4周

提供蛋白样品及报告

案例展示

HEK293细胞瞬转表达病毒跨膜糖蛋白RG