1.载体构建
(1)可将cDNA克隆至客户或者普健生物提供的哺乳细胞的表达载体中
(2)可在表达载体中添加分泌信号肽和纯化标签,促进蛋白分泌表达及满足一步亲和纯化的需求
(3)能生产并鉴定高效稳定细胞系,适合大规模发酵生产
2.稳定基因表达符合长期生产需求,整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产
3.瞬时表达(TGE)
(1)与稳定基因表达相比,TGE主要适用于短期内制备重组蛋白,一般在10天内即可快速转染,无需质粒DNA的遗传性选择
(2)普健生物的瞬时表达使用悬浮细胞,能够完成毫升到100L的体积的蛋白表达
4.工艺过程开发及扩大规模。普健生物能够优化表达过程以及表达产物,预测细胞表达量,摸索发酵罐发酵条件,适合大规模发酵生产
5.纯化:普健生物拥有完善的蛋白纯化系统,亲和纯化,凝胶过滤,离子交换及疏水层析等纯化方法,能够完成各类型蛋白的纯化,以及纯化工艺的摸索
普健生物提供表达载体构建、瞬时转染、表达测试及大规模动物细胞发酵和蛋白纯化等一站式蛋白技术服务。
表达方式 |
细胞 |
瞬时表达 |
HEK293,HEK293细胞来源于293细胞系,采用无血清悬浮培养CHO-S,CHO-S细胞是来自中国仓鼠卵巢细胞的克隆分离株,被驯化为无血清悬浮培养 |
稳定表达 |
CHO-K1,CHO-K1由CHO衍生而来,该细胞株培养条件简单、贴壁强度适中,比较容易转染 |
稳定细胞株构建 |
DG44,DG44 细胞(二氢叶酸还原酶缺陷型 , DHFR-)由中国仓鼠卵巢(CHO)细胞衍生而来,常用于构建适合重组蛋白生产的细胞系。DG44细胞筛选和共扩增标记是DHFR基因(dhfr) |
表达载体:pcDNA3.1, pIRES, pTT3, pCEP4,pATX1等