普健生物提供的分子间相互作用服务基于BiacoreTM、openSPR两大系统,其原理是基于表面等离子体共振 (SPR)技术,能够快速实现对分子间(蛋白与蛋白、抗原与抗体、蛋白与小分子)亲和力的定性以及定量分析。与传统的GST pull down,免疫共沉淀等相比,具有更高的灵敏度、检测通量及较低的样品要求等优点。
表面等离子体共振 (SPR)亲和力测定是一种基于光学的无标记检测技术,用于实时检测两个或多个分子之间的分子互作。SPR亲和力检测是一种通过传感器芯片跟踪信号变化来检测分子相互作用的方法。SPR信号通过折射率变化呈现,它指的是响应单位 (RU) 大约相当于1pg/mm2的蛋白质表面浓度。在两个分子之间的相互作用过程中,随时间绘制SPR信号会产生传感图,该图可以实时可视(图 1)。一般结合反应包括三个阶段:结合、平衡和解离;将这些传感图数据与数学模型拟合,科学家们可以计算关联 (Ka) 和解离 (Kd) 速率常数,并最终确定结合亲和力(KD)。与基于平衡点测量抗体结合亲和力的等温量热法 (ITC) 不同,SPR可以获得完整的动力学参数来评估结合和解离的所有影响以及抗体亲和力。