稳定细胞系构建

细胞转染，是将外源分子(如 DNA,RNA 等)导入真核细胞中的一种技术;

转染分为：瞬时转染和稳定转染

瞬时转染：指外源 DNA 或 RNA 转入宿主细胞后不整合到宿主染色体中进行外源目的基因的表达

稳定转染：指外源 DNA 转入宿主细胞后将外源目的基因整合到宿主染色体中进行表达

稳定转染的特点：

1. 目的基因整合到染色体上，需要使用线性 DNA(线性 DNA 虽然比超螺旋状的 DNA 转入量低，但整合率高)

2. 外源 DNA 整合到宿主细胞染色体中大约为 1%，通常需要通过一些选择性标记反复筛选，才能得到稳定转染的同源细胞系

3. 随宿主细胞基因组复制、转录、翻译，并被稳定遗传

4. 用于获得稳定表达的外源基因的单细胞克隆：如大规模蛋白质的合成，长期的药理学研究遗传机制的研究等

稳定细胞株：一般是将外源 DNA 克隆到具有某种抗性或者选择基因的载体上，载体被转染到宿主细胞并整合到染色体中，用载体中所含的选择标志进行筛选，筛选得到可稳定表达目的蛋白的细胞株

稳定细胞株构建流程

高质：外源基因严格鉴定，细胞来源清晰，无污染

高产：重组蛋白 / 抗体表达量可快速优化至 2g/L 以上稳定表达

稳定：独有的 GS 稳转系列载体配合 MSX 药物筛选，实现稳定传代 15 代以上

快速：筛选高产细胞株，周期短至 3 个月

灵活定制：可针对重组蛋白 / 抗体全长或片段进行个性化表达

经验丰富：专业的技术团队，已成功为国内外多家医药公司和研究单位构建交付稳定细胞株

多筛选系统：G418/ 潮霉素 / 嘌呤霉素筛选系统，GS/DHFR 双基因筛选系统等

构建生产重组抗体的CHO稳定细胞株