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前面我们和大家具体介绍过“抗体人源化的分类”，今天，我们在这里具体再和大家聊聊有关抗体人源化中的一些介绍过程。
抗体人源化作为解决鼠源抗体免疫原性的方式，其制作过程虽然说各有不同，但是，整体的过程也是大致相同的，但是，很多人在实验的过程中，常常会碰到一些问题，出现实验结果偏差的现象。其实这个问题非常的常见，主要还是因为我们没有严格地按照顺序来进行。下面，普健生物就和大家具体聊聊有关抗体人源化的实验步骤。
1、抗体可变区/抗体全长测序
通过对鼠源单克隆抗体细胞系进行可变区/抗体全长基因序列测序。
2、嵌合抗体表达及抗原抗体结合分析
在过程1的基础上，结合可变区的序列和人源恒定区进行嵌合抗体序列的设计，然后再通过哺乳系统来进行嵌合抗体的表达;通过对嵌合抗体的抗原抗体进行分析，同时提供样本进行亲和力检测。
3、人源化抗体设计
通过CDR移植、回复突变、生物信息学分析等方法对抗体的VH和VL区域进行人源化设计。
4、人源化抗体表达
密码子优化，基因合成，亚克隆，转染，抗体表达及纯化，8-10周。
5、人源化抗体性质检测
结合力检测：ELISA/FACS测定EC50值，或Biacore/Octet测定Kd值;人源化抗体体外生物活性分析并与嵌合抗体进行比较;人源化抗体与同源性物种的交叉反应性分析;人源化抗体生物物理特性分析：SEC-HPLC分析，DS-PAGE分析，DSC分析。
对于抗体人源化来说，人源化替换点可以说直接影响到CDR区构象的关键，所以，需要引起高度的重视。否则，极有可能体验“一失足成千古恨”的感觉。普健生物为广大用户提供专业的抗体人源化服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。
