单克隆抗体是由B细胞通过克隆所产生的具备高度均一且仅针对某种特定抗原表位所产生的抗体。一般来说,我们都会采用杂交瘤技术来对其进行制备,同时结合细胞融合技术,将具备该类分泌特异性抗体能力的B细胞进行繁殖,产生B细胞杂交瘤。那么,单克隆抗体产生的基本原理是什么呢?
我们知道,人体内只有骨髓细胞是可以在体外实现生长繁殖的,所以,我们一般用骨髓细胞来进行其与淋巴细胞的结合,得到一种骨髓瘤细胞。这种杂交出来的细胞会继承两种亲代细胞的特性,既具备淋巴细胞合成专一抗体的能力,又具备体外无限增殖的能力,所以,其非常适合用来培养细胞群,进一步为我们提供特异性单克隆抗体。
那么,单克隆抗体的具体制备流程有哪些呢?
一般来说,单克隆抗体制备的流程相对规范化,虽然一些公司有着各自不同的制备流程,但是大体来说,一般也遵循如下的顺序:免疫动物、细胞融合、选择性培养、筛选及纯化、大规模生产。
免疫动物。一般我们采用目的抗原去免疫小鼠,通过注射预定的抗原,刺激相应的B淋巴细胞克隆、增殖,最终形成B淋巴细胞;
细胞融合。取出小鼠脾脏并将其研磨,制备细胞悬浮液。然后将同系骨髓瘤细胞与细胞悬浮液按照一定比例混合,促使其融合;
选择性培养。其实就是杂交瘤细胞的筛选;
筛选及纯化。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,然后对其进行克隆扩增。之后测量其免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,之后在进行冻存。
大规模生产。搭建合适的生产环境,使得其可以大批量地生产特异性的单克隆抗体;
虽然说现在不同的厂家都有着不同的单克隆抗体制备方式,但是,总体来说,一般都遵循如上几种方式,产生的抗体特异性强,纯度高,能够在一定长度上满足我们的需求。当然了,因为人体的异源性,使得其无法达到我们的使用要求,之后,我们会和大家继续介绍一种可以提高其使用效率的方式“抗体人源化”。普健生物为广大用户提供专业的单克隆抗体制备服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。