细胞转染实验可以说是生物实验中的一道难关,做得好的话,可以大大降低实验难度;如果转染率低,那么,再昂贵的细胞也只能报废。有鉴于此,普健生物今天在这里和大家具体聊聊有关细胞转染的那些事。
一般来说,我们可以通过三个途径来进行细胞转染:物理介导、化学介导和生物介导。
物理介导:直接通过电穿孔、显微注射、基因枪等工具,将基因注入到细胞内部的方式;
化学介导:相对来说,化学介导的方法要多一些,比如通过磷酸钙共沉淀法、脂质体转染法等;
生物介导:一般采用病毒介导转染技术来实现;
对于细胞转染来说,需要转染效率高一级细胞毒性小等特点。所以,随着技术的发展,病毒介导的方式使用的越来越多,因为它能同时满足如上的两种需求。只不过,这种方法需要的技术水平较高,一般实验室较难达到要求。
常用的转染技术有哪些?
就现在而言,常用的转染技术主要有两种:瞬时转染和稳定转染。
瞬时转染(transient transfection):不会将外源的DNA/RNA整合到宿主染色体上,而且一个宿主细胞可以存在多个拷贝数,一般来说生产水平非常的高,但是持续时间要短很多(通常只能持续2-3天);
稳定转染(Stable transfected):会将外源DNA/RNA整合到宿主染色体上(也可能作为游离体)。外源DNA在染色体中的表达量低;
对于瞬时转染和稳定转染来说,不存在那个方法更好的说法,只是说,在不同实验需求中,哪个方法更加合适。对于那些理想的既能保证高转染率,又能低细胞毒素的情况,几乎不能能完全实现。只有最合适的方法,没有最完美的方法。更多细胞转染知识,敬请关注武汉普健生物。