基因工程技术作为现代生物科学技术的核心,被广泛应用于工业、环境、能源、医药以及农牧业等领域。其关键技术是DNA的连接和重组,而在此过程中发挥重要作用的就是核酸工具酶。
核酸工具酶种类繁多、功能各异,主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶等。这些酶具有特异性的序列识别能力以及高效的催化活性,在一定的条件下可以对核酸进行切割、连接、扩增及修饰等,反应条件温和且具有出色的生物相容性,因此,被广泛地应用于核酸、蛋白质和小分子等生物活性分子的分析检测。
具体的各种酶的功能,大家应该都比较清楚(不清楚的请去留言),这里不过多赘述,我们聊聊大家比较关心的问题——酶能不能达到预期效果。别人的不清楚,我们普健自产的几个核酸工具酶,效果还是不错的。
核酸工具酶
重点推荐
AtaGenix 全能核酸酶
Benzonase Nuclease全能核酸酶,是一种经过基因工程改造的核酸内切酶。它能够在非常广泛的条件下(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解所有形式的(双链、单链、线状、环状或超螺旋形式)DNA和RNA。全能核酸酶不特异性识别碱基序列,可在链内任意核苷酸间进行切割,广泛用于去除生物制品中的核酸。
产品优势
经长期项目检验,纯化中可有效降低蛋白样品粘度,去除蛋白样品中核酸的污染。
试剂兼容性高,可用于去除细胞、病毒等实验中的核酸,也可用于去除生化分析样品中的核酸。
高效的核酸消化能力,酶活>800U/μL,比活>1.0×106U/mg,降解所有形式的DNA和RNA。
严格质控,每个批次产品均经过活性和功能验证,保证产品质量。
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AtaGenix Benzonase Nuclease全能核酸酶
Taq DNA Polymerase
Taq DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶和微弱的5'→3'核酸外切酶的能力,但没有3'→5'外切酶的能力,这意味着在3'末端会出现一个dA突出。利用该特性,它可被用于TA克隆。
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT),是一种模板依赖的 DNA 聚合酶,可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的 3’羟基端加上dNTP,最短可催化3个核苷酸长度的寡核苷酸。
我们还有另一类工具酶
蛋白工具酶
这类蛋白研究工具酶是由普健生物经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,具有识别特异性氨基酸序列位点,并将对应蛋白标签切割下来的作用。
IdeS Protease
产品优势
IdeS具有独特的底物选择性,高度特异性的IgG切割,快速生成高纯度的片段,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。
高纯度:可溶性高效表达,宿主蛋白残留低,纯度>95%;
高稳定性:严格质控,每批产品均经过活性和功能验证,保证产品质量;
高酶活:酶活>20U/ul,可以特异性的酶切IgG抗体获得所要的抗体片段;
无动物源性:重组表达,全程未使用任何动物源原料,无外源性病毒污染。
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IdeS Protease——特异性切割IgG,一个挑剔的工具酶
TEV Protease
高活性、高特异性,去标签首选
TEV蛋白酶(重组型)是经基因工程改造后的重组蛋白酶,可特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly七氨基酸序列,它与肠激酶 、凝血酶、Factor Xa、SUMO等蛋白酶相比,具有高活性和高特异性的双重特点,已成为融合蛋白表达后去除标签的首选蛋白酶。
rb-EK
高专一性、高效酶切、比活性高
重组牛肠激酶(rb-EK)是一种丝氨酸蛋白水解酶,能高效专一地识别蛋白质中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列,并在赖氨酸(Lys,K)的C端水解肽键,产生切割,在生物体内水解胰蛋白酶原转变为胰蛋白酶。由于肠激酶具有高度专一性和高效酶切特性,广泛地应用于基因工程产品的开发。天然肠激酶由1条115 kDa的重链和1 条35 kDa的轻链组成,重链起锚定细胞膜的作用,轻链具有全酶完整的催化活性。普健生物表达的牛肠激酶轻链活性核心区域,比活性更高,特别适用于基因工程融合蛋白的酶切。
PNGase F
PNGase F(肽N-糖苷酶F)是一种酰胺水解酶,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。PNGase F可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖及杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。PNGase F不会去除常见植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 岩藻糖连接的寡糖。
3C Protease
3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非结构蛋白的关键酶,在病毒复制过程中发挥着重要作用。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特异性,能特异切割位于Gln-Gly之间的肽键,识别位点为 Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。普健生物将人鼻病毒3C蛋白酶的编码区基因在大肠杆菌中进行表达,纯化后获得了高纯度的重组3C蛋白酶,该蛋白酶能特异切割含有3C酶切位点的融合蛋白,具有良好的生物学活性。同时,普健生物自产的3C蛋白酶融合有GST标签蛋白,有利于后期将其从酶切体系中去除。
SUMO Protease
SUMO蛋白酶识别完整的含100个氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标签蛋白,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比,由于其识别序列长,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-37℃)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于使用亲和层析的方法,去除SUMO蛋白酶,纯化目的蛋白。本产品经验证在 TBS pH 8.0 和 PBS pH 7.5 反应体系中均可使用。
AtaGenix现有工具酶
货号 |
工具酶 |
ATE00001 |
TEV Protease |
ATE00002 |
rb-EK |
ATE00003 |
3C Protease |
ATE00004 |
SUMO Protease |
ATE00005 |
PNGase F |
ATE00006 |
Taq DNA Polymerase |
ATE00008 |
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase |
ATE00009 |
Benzonase Nuclease |
ATE00010 |
IdeS Protease |