什么是内参抗体?如何挑选合适的内参抗体?

　　抗体因为随着使用需求的不同，也发展出了很多不同的类型，比如内参抗体、标签抗体。这些抗体针对不同的使用需求，有着不同的特性和使用方法，所以，选择合适的抗体，也是我们日常工作中非常重要的一环。那么，什么是内参抗体呢?它的作用又有哪些呢?且看普健生物和您一一讲述。

　　什么是内参抗体?

　　所谓的内参抗体，我们可以从字面上来解释，就是内部参照抗体，它和目的抗体没有直接联系，而是一种精准制备抗体的辅助抗体。

　　比如我们需要对不同条件或不同组织细胞中表达的目的蛋白的相对多少进行比较，那么就需要有相同的定量，这样才会具备比较的基础。但是在实验中，可能会因为蛋白浓度不太精准，或者在上样蛋白的时候，因为操作而产生偏差，这个时候，就需要有一款内部参照抗体来进行校正作用。这类抗体需要在冉细胞或组织间具备恒定的表达特性，而且表达量要高。这类抗体，我们称之为内参抗体。

　　如何挑选合适的内参抗体呢?

　　对于内参抗体的挑选需要注意到很多细节方面的问题，通常我们可以结合如下四点进行挑选：

　　1、根据样本来源挑选。针对哺乳动物的组织细胞样本，我们可以从GAPDH、COX4等产品中进行挑选，其他来源的样本，则需要结合相关文献挑选;

　　2、根据分子大小挑选。针对分子量的不同，我们需要结合分子大小来挑选合适的内参抗体。在WB实验中，我们一般选择大小差异5kDa以上，也就是说不要选择分子量太过接近的，否则不利于后期的条带分析;

　　3、结合表达位置挑选。一般的蛋白检测可以考虑选择那些常用的内参抗体(比如：β-actin、GAPDH抗体等)。当然了，针对哪些核蛋白很定的，我们可以考虑结合文献来进行选择;

　　4、根据表达恒定性挑选。挑选的抗体需要看其是否会受到条件变化的影响，比如温度、PH值、浓度等方面的影响，这个很重要。比如，GAPDH常常用来作为内参抗体，到那时在进行代谢研究的时候，就不适用;

　　总的来说，内参抗体的选择并没有想象中的复杂，需要结合使用需求，选择合适的。当实在不知道如何选择的时候，我们可以结合相应的文献来进行挑选，一般来说，都能够选择到合适的抗体产品。普健生物专业为广大用户提供优质的抗体制备和定制服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。