对单克隆抗体和多克隆抗体有一定的了解后,我们又发现了一个新的词:抗体库,也有称之为抗体文库的。因为在涉及噬菌体展示技术的时候,常常会提到一个词:噬菌体展示文库。以前一直不明天,为什么要这么表述。有鉴于此,今天普健生物就和大家一起学习学习。
首先,什么是抗体库?
顾名思义,抗体库指的就是机体在受到抗原刺激后,产生的一系列特异性抗体的总和。简单来说,就是某种抗原刺激机体后,会产生各类抗体,这些抗体的混合物则被称为抗体库。
噬菌体抗体库的构建流程为何?
1、提取RNA。通过离心、震荡、静置等一系列的手段,提取无RNA酶的RNA;
2、反转录。将提取出来的RNA通过反转录的方式,获得cDNA;
3、抗体片段扩增。通过反转录cDNA中扩增特定的抗体片段,对其进行片段扩增;
4、克隆到噬菌体上。将扩增所得的多样DNA进行抗体基因序列和噬菌体载体的酶切,将所需片段克隆到噬菌体质粒上;
5、转化菌库。通过对其连接产物进行电转和培养后,获得菌库;
6、扩增并纯化。将上一步的菌体混合物进行培养后,通过相关操作对其进行扩增和纯化,最终获得数量足够的抗体库;
当然了,如上我们也只是和大家简单聊了一下大概的步骤,真是操作的复杂程度非一两句可以描述得了的。如果您有兴趣,可以在我们之前发布的文章“纳米抗体之噬菌体文库构建过程详解”中进行详细了解。当然了,如果您想要构建噬菌体抗体库,您也可以直接联系普健生物,我们拥有15年蛋白抗体制备经验,为您提供最优质的服务,欢迎您的来电咨询。
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