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划重点：
•杂交瘤技术是获得单克隆抗体最常用的技术。
•杂交瘤技术变体包括B细胞和立体特异性靶向协议。
•噬菌体展示技术和单B细胞技术是杂交瘤技术的替代方案。
单克隆抗体(mab)是一种通用的高度特异性结合蛋白，长期以来被认为是对抗疾病的“魔弹”，也是诊断和研究等其他生物学用途的重要工具。这些应用只有在允许分离单个抗体的方法出现后才有可能。杂交瘤技术是这方面的先驱。事实上，这项技术彻底改变了治疗和研究领域，1984年诺贝尔生理学或医学奖进一步认可了这一点。那么杂交瘤技术随着时间的推移发展，与其他方法相比，杂交瘤技术又有哪些优势和局限性呢？
杂交瘤技术由Georges Köhler和Cesar Milstein于1975年基于用所需抗原免疫动物，然后将特异性B淋巴细胞与“不朽”骨髓瘤细胞融合，然后被克隆以获得稳定的单克隆细胞系，在选择感兴趣的抗体分泌克隆后，将细胞转移到大规模培养装置中，以产生所需数量的抗体。
自引入杂交瘤技术以来，单克隆抗体对医学产生了深远的影响，提供了几乎更多的诊断和研究试剂来源。鉴于单克隆抗体的通用性和实用性，杂交瘤技术带来了许多发现，允许产生针对抗原的抗体，甚至针对同一抗原的不同抗体。但杂交瘤技术也有其局限性，因此，科学家们在杂交瘤技术的基础上，还发现了噬菌体展示技术和单B细胞技术。
杂交瘤技术
优点：
保留了可变区和恒定区基因组合的原生配对。
抗体嵌合和人源化方法以及转基因动物可用于获得用于人类治疗的单克隆抗体。
抗体在体内亲和成熟。
缺点：
需要已知和可用的抗原靶点。
细胞融合和杂交瘤分离效率低。
细胞系的产生和特异性杂交瘤的选择需要相对较长的时间。
杂交瘤细胞系可能在遗传上不稳定。
细胞培养物污染的持续风险。
噬菌体展示技术
优点：
不需要动物宿主。
大量克隆的筛选增加了产生良好单克隆抗体的机会。
分离抗毒性和非免疫原性抗原的单克隆抗体的潜力。
重新设计天然cdr以产生特异性和亲和力更高的单克隆抗体的可能性。
庞大的展示文库数据来源。
缺点：
噬菌体文库的多样性取决于细菌转化效率。
抗体格式仅限于scFv和Fab。
建立噬菌体展示文库成本高昂。
单个B细胞技术
优点：
与杂交瘤技术相比，获得特异性单克隆抗体的效率更高。
从接种疫苗或自然免疫的人类受试者中分离单克隆抗体的可能性。
原生单克隆抗体的分离，并保留天然同源VH和VL配对。
不需要B细胞培养过程。
具有分离抗体外难以模拟的构象决定簇的功能性单克隆抗体的潜力。
可以区分处于不同发育和分化阶段的B细胞。
在实验研究中，B细胞可以从多个样本中分离出来，而不需要对动物实施安乐死。
抗体在体内经历亲和成熟。
缺点：
单细胞分选设备价格昂贵。
RT-PCR程序可能具有挑战性。
针对B细胞标记物的抗体并非适用于所有物种。
