联系我们
写在前面
近年来抗体在检测、诊断、治疗等方面发挥了越来越重要的作用。兔单克隆抗体具有比鼠源抗体活性更好且灵敏度更高、比人源抗体更易获得等优点。构建免疫噬菌体展示抗体库是目前获得兔源单克隆抗体库比较常用的方法。
兔抗体库以多克隆抗体(polyclonal antibody, pAbs)的形式被广泛应用于免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)、蛋白质印迹法(Western blot)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和流式细胞术等免疫学研究领域，是获得高亲和力和特异性抗体的重要来源。人类和小鼠在VH-D-JH(重链)和VL-JL(轻链)基因重排后几乎完全依赖体细胞超突变来进一步多样化抗体基因，而兔的V-(D)- J重组之后是体细胞基因转换和体细胞超突变，以扩展一组和二组抗体库。此外，家兔(Oryctolagus cuuniculus)属于兔形目(Lagomorpha)，与啮齿类(Rodentia)的分类学目小鼠、大鼠等啮齿类动物在进化上距离较远。众所周知，抗原的来源与免疫动物之间种系关系越远，其抗原免疫原性越强，越易产生免疫应答；反之，种系关系越近，则抗原免疫原性越弱。因此，由于免疫耐受，鼠和人单克隆抗体(mAbs)无法识别的鼠和人抗原之间保守的表位往往可以被兔单克隆抗体(mAbs)识别。然而，大规模使用多克隆抗体的可行性受到一些因素的限制，例如在工业上稳定地复制的挑战。通过噬菌体展示或杂交瘤技术产生兔单克隆抗体的能力克服了这一限制。
噬菌体展示技术产生的兔单克隆抗体具有表型和基因型同时被选择的优点。对兔单克隆抗体(mAb)序列的分析使我们能够制备多种格式的单克隆抗体(mAb)，包括scFv, Fab, scFv- fc和IgG，更重要的是，可以进行人源化和亲和成熟。因此，通过噬菌体展示技术制备的兔单抗已成为一种有前景的人类诊断和治疗试剂。研究人员利用遗传多样性的naïve家兔骨髓和脾脏的逆转录mRNA和一组用于PCR扩增轻链和重链的寡核苷酸，建立了包含> 100亿家兔单抗的噬菌体展示文库，并通过二代测序(NGS)进行验证。
利用噬菌体展示技术，普健生物提供构建噬菌体展示抗体文库、噬菌体展示多肽文库、抗原表位筛选、抗体亲和力成熟等技术服务。同时普健生物具有鼠源天然抗体文库、兔源天然抗体文库、纳米抗体天然抗体文库、重组全人源噬菌体抗体文库等。
服务优势
1. 丰富的噬菌体抗体技术经验，五年以上噬菌体抗体开发，交付上百个噬菌体展示抗体开发项目
2. 具有全人源重组抗体库，库容高达千亿级别（1011 pfu)，两步建库法，保证了文库的多样性，抗体库片段插入
正确率高；可以两周拿到全人源重组抗体
3. 可以构建多物种（人源、小鼠、兔子、羊驼等）抗体文库
4. 可以构建多种类型（scfv、Fab、VHH 等）的抗体文库
参考文献
Haiyong Peng,Mining Naïve Rabbit Antibody Repertoires by Phage Display for Monoclonal Antibodies of Therapeutic Utility,Journal of Molecular Biology,Volume 429, Issue 19, 15 September 2017, Pages 2954-2973
