如何使用单B细胞技术制备兔单克隆抗体?

　　单克隆抗体制备是一项精细且复杂的工作，需要通过一系列的手段才能实现抗体的制备。而且随着技术的不断发展，单克隆抗体从杂交瘤技术发展到现阶段使用最为广泛的单B细胞技术。

　　单B细胞技术其实就是通过分离单个B细胞，通过对其进行克隆培养，结合多种PCR技术形成的一种体外筛选及表达体系。使用单B细胞技术制备的单克隆抗体具有高通量、高效率、低细胞数等优点，是现如今最近、最高效的抗体筛选方法之一。

　　单B细胞技术制备流程：

　　1、鉴定和分离单个B细胞

　　单B细胞分离通常有两种：随机分离和抗原特异性分离。通过多次免疫兔子，检验血清中抗体含量及质量，而后从中分离出B细胞;

　　2、扩增和克隆抗体基因

　　进行细胞分选时，需要将B细胞注入到合适的培养液中，然后对其进行RNA提取并进行逆转录;

　　3、重组抗体表达

　　对所得DNA进行目的基因表达，获得相应的目标抗体;

　　4、抗体鉴定

　　将所得抗体进行纯化(可采用亲和层析法或离子交换层析法进行纯化)，而后对抗体的特异性和生物活性进行鉴定;

　　5、大规模生产

　　测定所得目的抗体特异性和生物活性达到我们要求后，开始进行大规模生产;

　　单B细胞技术制备的单克隆抗体的优势：

　　1、高特异性。和其他动物相比，兔免疫系统更加优秀，所得抗体特异性更强;

　　2、高稳定性。兔单克隆抗体稳定性更高;

　　3、高亲和力。兔B细胞的亲和力是其他动物的10-100倍;

　　当然了，单B细胞兔单克隆抗体制备技术虽然具备着其他抗体表达系统所不具备的优势，但是，它需要的技术水平更高，相关制备成本也更高一些。总的来说，只有具备相应技术实力的公司才能采用单B细胞技术制备抗体。普健生物专业为广大用户提供兔单克隆抗体制备服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。