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抗原制备时常用的方法、条件及制备方式

发表时间:2024-03-20 访问次数:767

  无论是单克隆抗体制备还是多克隆抗体制备,抗原的设计都是最为重要的一个过程,只有设计出合理的抗原,才能更好地刺激机体产生抗体。那么,抗原制备需要具备哪些条件?具体制备方法有哪些?以及制备过程中的注意事项有哪些?下面,普健生物和大家具体聊聊。

单克隆抗体和多克隆抗体

  一个良好的抗原制备条件有哪些?

  1、分子足够大。对于多肽或蛋白类抗原来说,其抗原决定簇直接关注到其抗体的产生。但是,对于抗原决定簇来说,其通常由6-8个氨基酸残基组成,所以,只有分子量足够大的抗体才能承载得上;

  2、外源性强。所选抗体尽量和免疫机体异源性高,这样才能更好的刺激机体产生抗体;

  3、结构更复杂。一般来说,简单的物质不具备免疫原性,只有结构足够复杂,才能在更大程度上刺激免疫反应的发生;

  4、可降解性好。作为抗原,必须是可降解的,否则,很容易对机体造成不可挽回的影响;

  常用的抗原制备方法有哪些?

  1、高纯度的天然蛋白。一般来说,蛋白存在翻译后修饰,其结构复杂度也是非常高的,所以,天然蛋白就是很好的抗原,只是需要做好纯化操作;

  2、高纯度的重组蛋白。天然蛋白既然可以用作抗原,重组蛋白自然也可以。而且生产过程更容易掌控,也可以根据需求进行设计,当然了,纯化依然是必不可少的一个方面;

  3、人工合成的多肽。合成的多肽也能在 一定程度上影响到机体,使得其产生免疫反应。但是,一般来说多肽的分子量都较小,需要将多肽连到一个较大载体来增加其免疫原性;

  抗原设计时需要注意的问题有哪些?

  1、序列的外源性。设计出的序列不能和动物体内的序列相同,否则很难产生免疫反应;

  2、蛋白的亲疏水性。对于蛋白来说,亲水端一般显露在外,而疏水端则隐藏在内部,所以,设计的片段尽量选择亲水;

  3、N端与C端的选择。对于抗原来说,末端肽段效果要优于中间段肽段;

  4、多肽的长度。一般来说,一个抗原决定簇由6-8个氨基酸组成,所以,多肽的长度不能少于6个氨基酸;

  无论对于抗原还是抗体来说,都需要保持其高纯度。纯度越高,其可能产生的非目的性免疫反应就会越小,目的蛋白的比重就会越高。当然了,作为抗原,不能有太大的毒性,既要让机体产生免疫原性,又要不对机体造成太大影响。普健生物专业为广大用户提供抗原制备服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。