单克隆抗体纯化的原理及其具体操作步骤盘点

　　单克隆抗体制备后，我们都需要对所得抗体进行相应的纯化工作，只有提纯，才能让减少抗体的杂质，并提升抗体的作用效果。可以说，抗体纯化是抗体必不可少的过程。那么，您知道怎么做抗体纯化吗?抗体纯化的具体操作步骤是怎样的?今天普健生物就和大家具体聊聊。

　　我们知道，抗体主要来源于血清，通过反复想动物体内注入抗原产生。然后，对血清进行相关抗体的提取，这个过程就是抗体纯化。

　　抗体纯化的原理：

　　抗体纯化的原理主要是根据蛋白的一些性质不同，将其从混合液中提取出来的方式。比如利用蛋白分子大小不同、PH溶解值不同、溶解度不同、吸附性质不同、生物亲和力不同等一系列的手段，将其从溶液中提取出来的方式。

　　抗体纯化的具体步骤：

　　1、蛋白提取

　　通过手段破碎细胞，使得蛋白得以释放出来。通常利用裂解缓冲液破碎细胞，而后通过离心等方法去除细胞碎片，再将蛋白从裂解液中溶解出来;

　　2、抗体富集

　　通过层析的方式，使得抗体更集中。常见的方法有亲和层析(利用抗体及其特异性之间的特异性结合)、离子交换层析(利用抗体与离子交换介质之间的电荷相互作用来实现富集)、尺寸排除层析(根据分子大小差异，利用多孔介质筛选);

　　3、纯化和浓缩

　　通过透析膜将富集的抗体从介质中洗脱出来，并去除盐离子等小分子杂质，之后在利用浓缩装置，将目标抗体浓缩到较小的体积;

　　4、纯化验证

　　通过SDS-PAGE、Western blot等手段，验证抗体的分子量以及特异性结合的能力;

　　总的来说，抗体纯化是一个非常复杂的过程，我们需要结合抗体的具体情况选择具体的纯化方法，这样不仅能节约大量的时间，而且能够有效降低其成本投入。武汉普健生物专业为广大用户提供单克隆抗体纯化服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。