如何在大肠杆菌表达系统中实现高通量表达

　　在生物技术发展的今天，蛋白表达在科学研究以及临床治疗中起着非常重要的作用。而在基因技术发展的今天，蛋白的需求日益增加，大肠杆菌表达系统因为其遗传背景清晰、成本低以及生长迅速的优势，使得其成为重组蛋白表达的首选。

　　什么是高通量蛋白表达技术?

　　高通量蛋白表达技术其实就是一种能够实现大规模、高效的制备蛋白的技术，可以通过不同的方法来实现目标蛋白的表达。

　　高通量蛋白表达的步骤有哪些?

　　1、目的基因制备

　　作为蛋白表达，基因制备是第一步。目的基因的提取方法有很多，传统的方法主要是通过从cDNA文库中提取。但是，这种方法存在一定的局限性，费时费力，而且难以添加融合标签。现阶段常用的方法主要采用PCR技术，设计好引物后，即可在PCR仪中完成目的基因的提取;

　　2、高通量表达系统构建

　　和传统的蛋白表达系统构建相似，高通量蛋白表达系统的构建没有特别大的改动，只是说在一些细节方面有着一定的不同。比如在目的基因转录和表达之前需要添加融合标签，以便于提升其表达效率;

　　3、菌株培养

　　在表达系统构建成功后(一般来说，我们会选择大肠杆菌菌株来进行表达)，而后选择出合适的菌株。当然了，对于大肠杆菌的培养来说，我们尽量选择分批培养，这样才更加有利于菌株的控制;

　　4、高通量蛋白表达及纯化

　　采用高通量的平台，能够实现迅速地进行基因克隆、挑选菌落、质粒分离、蛋白表达以及蛋白纯化等操作。当然了，虽然说这个平台的构建相对困难，但是，对于那些复杂的分子实验来说，往往能提供极大的便利;

　　采用大肠杆菌表达系统来实现高通量重组蛋白的表达，能够在极大程度上推进蛋白的表达进程。虽然说在其技术水平上有着一定的要求，但是随着技术的不断优化和创新，能够让其更加高效且可靠的进行蛋白表达。