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什么是大肠杆菌蛋白表达?它的组成有哪些?

发表时间:2022-08-30 访问次数:1852

  大肠杆菌是第一个用于蛋白生产的宿主菌,因为它的遗传背景清晰,培养操作的过程简单,而且引起它转化快、传导效率高、生长快等优点,最主要的是因为其成本低廉,使得其广泛地使用与蛋白制备上。而且因为其蛋白表达要远高于其他基因表达系统,使得其成为使用最为广泛的蛋白表达系统。

  那么,大肠杆菌蛋白表达的组成是什么呢?

  1、表达载体

  直接通过载体来进行蛋白表达。我们知道,完整的载体必须有复制的起点、启动子、插入基因、筛选标记和终止子。所以,我们只需要根据蛋白生成的环境对其进行表达,或者通过在目的蛋白的N端或C端加入特殊序列,促进蛋白的可溶性和正确折叠;

  2.外源基因

  在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因,包括原核基因和真核基因;原核基因可以在大肠杆菌中直接表达出来,但是真核基因韩有内含子不能,大肠杆菌不能对mRNA进行剪切,从而形成成熟的mRNA,所以真核基因一般以cDNA的形式在大肠杆菌表达系统中表达。此外还需提供大肠杆菌能识别的且能转录翻译真核基因的元件。

  3、表达宿主菌

  直接采用大肠杆菌来进行蛋白表达。当然了,宿主菌的选择需要基于宿主细菌的特性和靶蛋白的特征来进行。