盘点大肠杆菌重组蛋白表达过程中的一些常见问题

　　大肠杆菌作为最早用来生产蛋白的一种方式，为我们的健康起到了非常大的作用。如果采用大肠杆菌来作为宿主生物，它具备生长快速、亲公司那个实现以及外源DNA转化快速等优点，使得它的使用非常的广泛。但是，我们日常在大肠杆菌生产的过程中尝尝会遇到一些小问题，导致所产生的蛋白达不到我们的要求，今天，普健生物就在这里和大家具体聊聊大肠杆菌重组蛋白表达。

　　1、质粒的选择

　　我们常说的质粒包括复制子、启动子、选择标记、多个克隆位点等，因为需要选择的选项比较多，而且表达载体的目录比较大，所以，我们时常会出现选择出错的情况。这个时候，我们就需要根据个人的需求去仔细选择，这样才能避免相关问题的出现;

　　2、复制子

　　复制子其实就是由一个复制起点和相应的顺式作用控制元件所组成，而我们日常工作中想要选择合适的载体时，最需要注意的一个重要参数就是基因拷贝数，而基因拷贝数的控制权则位于复制子中。高质粒数量的复制子在极大程度上会造成代谢负担的提升，可能会导致细菌的生长速度出现降低的现象，而且可能会造成质粒不稳定的现象，最终导致用于蛋白合成的健康生物数量下降;

　　3、其他可能遇到的问题

　　虽然说现在可以通过一定的手段来实现在短期内处理数百种蛋白，但是这项技术存在着一定的局限性，需要在后期的实验中不断改进。而且对于大部分的实验室来说，自动化平台相对昂贵，价格相对来说难以承受;

　　总的来说，大肠杆菌蛋白表达所具备的优势是无与伦比的，因为其周期短、操作简单、失败率低的情况，只要我们做好相应的准备工作，按照程序来设计，这样就能在极大程度上降低其失败的情况。更多蛋白表达的相关知识，敬请关注普健生物。