盘点抗体提纯中常用的几种方法

　　抗体提纯在抗体应用中是非常重要的一种手段，它能够有效提升抗体的特性，降低所产抗体的副作用。所以，抗体纯化操作具备非常重大的意义。而每个企业在生产工艺、技术水平等方面存在极大的差异，所以纯化方法也是各不相同。不过总体算来主要有亲和层析法、离子交换层析法、尺寸排阻色谱法以及殊死作用色谱法。今天，普健生物就在这里和大家具体聊聊这四种方法。

　　1、亲和层析法

　　亲和纯化是一种通过可逆反应达到分离纯化的技术，更适合用来从成分复杂并且杂质的含量要远高于目标蛋白的提纯。先通过琼脂糖与介质进行偶联，使得其结合成为具备相关特异的介质，然后通过配体进行选择性地吸附，再通过平衡液清洗掉杂质，从而提取到我们需要的目的抗体;

　　2、离子交换层析法

　　这个方法的原理是利用带有电荷的溶质分子，通过其与带有相反电荷的固定化离子交换基团之间发生可逆的相互作用。抗体本身就是一种蛋白，它可以在一定PH值的缓冲液中点解成离子，我们可以通过邓店点pl来进行离子交换层析实验，提取出该层的离子后，再通过改变缓冲液的PH值分离出目标蛋白的目的;

　　3、尺寸排阻色谱法

　　这个分离方法相对温和，所选尺寸排阻的分离原理主要取决于分子其在溶液中的体积。当我们将溶液加入纯化柱时，其分子会按照其尺寸进行从大到小地分离。分子小的流动速度相对缓慢，大的分子会被快速排出。所以，通过分子的大小进行纯化，就能够进行有效且快速地筛选;

　　4、疏水作用层析法

　　疏水作用层析法其实就是利用盐-水体系中疏水基团和层析介质的疏水配基之间疏水力的不同而进行分离的一种层析方法。这种方法就是利用变形后的蛋白暴露出的疏水残基，或者在高盐环境下暴露于分子表面的疏水残基，依次用从高至低离子强度洗脱液将疏水用作由弱至强的组分进行分离的方式;

　　或许又有人要问了：这四种蛋白纯化方法，哪种方法更好呢?总的来说，这四种方法各有优势，当然也各有不足之处，需要结合抗体的来源、时间需求、成本预算以及抗体用途等一系列的需求进行考虑，选择一种最适合的蛋白纯化方式。普健生物专业为广大用户提供蛋白纯化服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。