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真核蛋白表达相信大家不会觉得陌生，我们前面和大家具体聊过有关真核表达的几种方式以及其优势所在：“常见的真核表达系统有哪几种?它们各自有哪些优势?”。今天普健生物再和大家具体聊聊有关真核表达的步骤以及在表达过程中导致其表达低下的原因。
真核表达，顾名思义，就是利用真核细胞进行蛋白表达的技术服务，通常在需要大量高质量蛋白的时候会采用这个方式，当然了，药物开发以及生物学研究上也常常会使用到。
真核表达服务的具体步骤一般如下：
1、基因克隆。通过基因技术将目的基因克隆到真核的表达载体当中去;
2、细胞培养。将载体转染到真核细胞中，并通过细胞培养的方式对细胞进行扩增;
3、蛋白表达。通过操作以及环境搭配等手段满足蛋白的表达条件，使得目的蛋白得以表达;;
4、蛋白纯化。通过相关技术对蛋白进行纯化(具体纯化方法可参考“蛋白纯化方法之沉淀法的几种常用方式介绍”);
当然了，不同的蛋白表达公司因为技术实力、实验环境以及仪器使用等方面的不同，在表达结果方面会存在很大的不同，甚至会出现表达量低的情况。为什么会会发生这样的情况呢?且听普健生物和您具体分析。
一般来说，导致蛋白表达量低下的原因有很多，主要是如下几种：
1、转染效率低。在进行细胞转染时，有一定的概率会发生转染率低的现象(当然了，也只有少数细胞会出现这个情况)，从而造成蛋白表达量降低;
2、基因转录水平低。一些基因的表达会受到细胞因子调节的原因，造成表达载体转录水平低而造成蛋白表达低的情况;
3、翻译后修饰不完整。在进行蛋白修饰的过程中发生了异常，导致蛋白结构不完整，从而造成表达量低的情况;
4、表达的蛋白不稳定。表达后的蛋白在溶液中因为不稳定的情况，出现失活的现象;
5、细胞毒素的影响。细胞产生的毒素造成蛋白失活;
6、条件不符合。蛋白表达的环境达不到要求，造成蛋白表达量低;
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