在蛋白抗体表达时,我们常常要将一段基因插入到合适的载体中,而后导入宿主细胞后表达出蛋白,这个方法称为重组蛋白表达技术。通过宿主来划分,我们将其分为原核表达和真核表达系统两种,根据目的蛋白的性质,我们选择合适的方法来进行表达。那么,到底什么是原核表达系统和真核表达系统呢?今天,普健生物就和大家具体聊聊。
所谓的原核表达,广义地来说,就是指发生在原核生物内的基因表达。而在生物工程中,我们将那些通过基因克隆技术将外源基因导入到原核生物细胞内,而后构建表达系统表达蛋白的方式称为原核表达。
而真核表达,顾名思义,将重组基因序列在真核细胞中表达的方式。总的来说,原核表达在原核细胞中表达,真核表达是在真核细胞中实现蛋白表达的方式;
原核表达和真核表达的优缺点各有哪些?
原核表达能够在短时间内获得所需蛋白,而且需投入的成本较低,操作简便,所表达的蛋白量也相对更高。但是蛋白无法进行翻译后修饰的操作,所以目的蛋白常常会以包涵体的形式存在,使得后期的纯化工作也变得更加的困难。同时因为其翻译后修饰的体系不太完善,无法影响其表达产物的生物活性,而且还会面临内毒素的影响;
真核表达通常会使用酵母、昆虫、动物和哺乳动物细胞进行表达,所以,其可以根据生物蛋白与靶蛋白特异性来设计,翻译后修饰技术也非常完善,使得表达的蛋白具备更高的生物活性。但是,真核表达系统的技术要求更高,投入成本也更大;
当然了,并不是说原核表达不如真核表达,针对不同的需求时,真核系统不一定能满足我们的需求。在选择表达系统的时候,我们需要综合考虑各种因素,比如蛋白的性质、我们所具备的实验条件、能够承受的生产升本、生产的安全性等等,综合考虑这些因素后,再选择最合适的