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无论采用哪种表达系统表达蛋白时，都会遇到一些问题，比如蛋白析出、蛋白表达量不高、表达条件不是最佳等等，使得所得蛋白没有达到预期。其实，这个问题除了我们在表达步骤设计上的问题外，还有就是在一些操作细节上不太规范。那么，有没有什么办法来提升蛋白表达及其可溶比例呢?今天，普健生物就和大家具体聊聊。
1、优化密码子。根据表达系统对密码子的偏好性进行优化筛选，提升表达效率。一般来说，我们优先选择那些使用频率大于20%的密码子，避免因为不充足的tRNA库，导致翻译的延迟或错配;
2、降低表达速率。可以通过降低IPTG的诱导浓度来降低蛋白的表达速率，通过速度的降低，使得其折叠率得到更好的平衡，最终提升蛋白的可溶性;
3、控制好温度。当温度保持在37度时，蛋白就容易形成一些包涵体，而30度的表达条件则更容易产生可溶、有活性的蛋白。所以，我们在表达蛋白的是，尽量控制温度保持在16、18或21度(当然了，在表达过程中会产生一定的热量，我们需要做好温度监控，及时予以调节);
4、改善细胞周质载体。细胞周质环境在一定长度上制约着蛋白的形成，优势的话更加有利于蛋白的折叠及二硫键形成;
当然了，还有很多其他方面的原因会制约到蛋白的表达和可溶性，我们在文章：蛋白表达-哪些因素会影响到蛋白表达?中和大家具体聊过，大家有兴趣的话可以具体点击阅读一下。
其实在蛋白表达的过程中，因为选择表达系统的不同、操作步骤不同、技术细节调整等一系列的差异下，都会造成所表达的蛋白和预期有着一定的偏差，其实这是正常的。毕竟，制约着表达成功与否的关键因素实在是太多了，只有将每个细节做到完善，才能表达出我们所需的蛋白。普健生物作为一家拥有15年蛋白表达经验的公司，专业为广大用户提供蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。
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