随着真核表达系统的出现,在极大程度上提升了蛋白的表达,不仅让蛋白表达量更高,更是提升了蛋白的特异性和结合力。可以说,真核表达系统是蛋白表达史上的一个重大进步。但是,因为其操作相比原核表达系统来说,更加的复杂,以及一些细胞本身特性,使得其蛋白表达低。那么,具体原因有哪些呢?今天,普健生物就和大家具体聊聊。
1、转录水平本身就低
其实就是DNA转录成RNA时,其转率效率较低的原因。在真核生物中,因为转率因子的缺失和不足,导致其转率水平很低。这个时候,我们可以考虑通过添加相关转率因子来提升其转化效率;
2、翻译效率低下
这个过程其实就是RNA翻译成蛋白序列的过程。同样,因为蛋白翻译因子缺失或不足,导致其效率低的情况;
3、蛋白稳定性低
所谓的蛋白稳定性,其实就是蛋白在细胞内的生命周期。我们知道,细胞内存在蛋白酶作用过于强烈或是蛋白修饰不足的原因,就会造成蛋白不稳定的情况;
4、信号肽问题
有些时候,因为构建的信号肽问题,使得蛋白表达量低,去掉信号肽后,表达量将得到提升。当蛋白表达量低时,其他办法的无效时,可以考虑去除信号肽试试;
当然了,真核蛋白表达量低的原因还有很多,除了我们说的如上几种方式外,还有很多其他原因,比如操作失误、温度、pH值不适合等一列的原因。所以,我们在进行蛋白表达的过程中,一定要严格按照实验标准来执行,这样才能在更大程度上保障蛋白的表达。普健生物专业为广大用户提供蛋白表达定制服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。