稳定细胞株的构建方式及其注意要点

　　在很多实验过程中我们都需要用到稳定细胞系，只是因为其构建时间长、构建成功率低，使得大家放弃这个方法。构建稳定细胞株往往耗时半年以上，别人的实验都收尾了，而这边却一点动静都没有，可以说，其中耗费的精力足够写一篇血泪史了。那么，如何构建稳定细胞株呢?今天，普健生物就和大家具体聊聊。

　　首先，我们需要知道，在什么情况下，需要构建稳定细胞株。

　　1、长期目的细胞研究时。一些细胞需要长期研究，通过构建稳定细胞株可以降低细胞变异率，极大程度上方便了实验研究;

　　2、蛋白半衰期时间长时。当蛋白半衰期长时，瞬时RNA就只能通过干扰表达，但是却无法去除已经表达的蛋白，通过稳定细胞株则可以更轻松实现;

　　3、高拷贝数表达需求时。这个时候会因为一些人为原因导致结果不准确;

　　4、需要诱导表达时。主要是一些致死基因或者是需要空表达的;

　　5、需要用到细胞时。比如裸鼠成瘤时;

　　那么，如何构建稳定细胞株呢?其具体原理是怎样的?

　　其实就是通过将外源DNA/RNA克隆到具有某种抗性基因的载体上，重组载体被转染之宿主细胞并整合到染色体中，能够随着细胞分裂而稳定地传代下去;

　　构建稳定细胞株有哪些方面需要注意的?

　　稳定细胞株构建是一个长期过程，从质粒包装到慢病毒包装，再到细胞感染以及筛选等等过程，每一步都至关重要。往往会因为一些小的失误，导致半年时间浪费掉的现象也不少见，所以，细节方面一定要严格把控;

　　对于一些小公司来说，稳定细胞株的构建可谓得不偿失，但是对于长期发展来说，稳定细胞株可以说是一项必不可少的技术。相对于一般的蛋白制备手段来说，稳定细胞株构建不仅能有效减少批次之间的差异问题，更是能在极大程度上保证蛋白抗体的活性一致性。普健生物专业为广大用户提供稳定细胞株构建服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。