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盘点蛋白表达中常用的一些蛋白标签及其作用

发表时间:2023-11-06 访问次数:568

  在我们进行蛋白表达时,常常会加入一些肽类和蛋白,使得其与目的蛋白融合表达,以便于我们进行进一步的检测、跟踪和纯化。这类肽类和蛋白,我们称之为标签蛋白(也叫蛋白标签)。一般来说,蛋白标签对蛋白本身并不会起到太大的作用,但是能够为我们蛋白表达的过程提供相关佐证。

  蛋白标签的具体作用:

  1、识别。通过给蛋白添加一些易于识别的标签,以达到快速鉴定目的蛋白的目的;

  2、跟踪。通过定位标签确定蛋白在细胞中的位置,进而了解其生理功能和信号通路等;

  3、定量。通过标签来确定蛋白的量;

  4、纯化。通过识别标签来对蛋白进行相关纯化工作;

  常见的标签蛋白及其特点:

  1、his标签。其特点是分子量小,不会影响到蛋白的理化性质,免疫原性低,主要用于蛋白纯化;

  2、FLAG标签。其特点是分子量小,不会改变融合蛋白功能,含有一个肠激酶切割位点,以便于标签的去除。主要用于免疫沉淀、免疫荧光以及ELISA制备;

  3、GST标签。特点是可用于增加外源蛋白可溶性,在大肠杆菌中科实现大量表达,特异性高,纯化方便;可用于蛋白纯化、酶学分析以及免疫分析;

  4、c-Myc标签。特点是以人Myc基因的一部分而尽量避免人源细胞的相关实验。主要用于WB、免疫沉淀、免疫荧光以及流式细胞术等;

  5、HA标签。特点是对外源蛋白空间结构影响小,容易构成标签蛋白。主要用于蛋白纯化、ELISA以及免疫沉淀等;

  当然了,虽然说很多标签都适用于蛋白纯化等操作,但是也要结合实际情况来进行选择,这样不仅能提升蛋白制备的成功率,也能在更大程度上满足标签蛋白的需求,当然了,制备成本也能得到很好的控制。武汉蒲建设横五专业为广大用户提供蛋白制备服务,如果您有香瓜需求,欢迎来电咨询。