单克隆抗体作为现阶段效果最佳、使用范围最广的一款药剂,在临床试验中起到了良好的效果。但是,现阶段常用的一些抗体制备方式中,常常会出现异源反应的情况。不仅会造成效果达不到预期,更有甚者会造成患者的不良反应。作为解决异源性的方法之一,全人源化抗体起到了至关重要的作用。噬菌体展示技术作为全人源抗体制备的主要方式,在极大程度上解决了这个问题。
那么,什么是噬菌体展示技术呢?
噬菌体展示技术其实就是一种高效的基因表达筛选技术,它通过将外源蛋白表达基因剪切到噬菌体的外壳基因中,在噬菌体表达外壳蛋白的时候,会同时表达目的蛋白。当然了,因为一些外壳蛋白可能会影响到目的蛋白的效果,我们还可以通过分离和筛选纯化等一系列的操作进一步提纯目的蛋白。
目前噬菌体展示技术已经非常的成熟了,在抗原表位分析、单克隆抗体制备、抗体人源化、药物筛选等方面有着广泛的使用。
噬菌体展示技术的技术难点体现在哪些方面?
虽然说噬菌体展示技术存在着如此众多的优点,但是,也并不是说随便一家公司就可以做的,不仅仅是因为技术方面的原因,成本投入也是很大一部分原因。想要噬菌体展示成功,有两大难点:噬菌体建库和噬菌体筛选。
1、噬菌体建库
将从B细胞内提取的抗体轻重链抗体片段群与噬菌体外壳蛋白融合,并进行融合表达,使其表达与噬菌体外壳表面,从而形成噬菌体展示抗体库。主要分为三种:scFv库、Fab库、VHH库;
2、噬菌体筛选
噬菌体筛选是其中的关键环节,主要包括淘筛和鉴定两个步骤。
一般在进行筛选的时候,我们需要进行报备抗原及对照,通过3-4轮的筛选,选择出合适的抗体。而后再通过多克隆ELISA判断特异富集,而后通过单克隆ELISA、阳性克隆VALIDATED ELISA来确定克隆测序,最后通过重组抗体表达的方式来制备所需蛋白;
噬菌体展示技术的优势体现在哪些方面?
和传统蛋白制备技术来说,噬菌体展示技术制备的蛋白能够满足大批量的生产,同时也可以通过基因技术,提升抗体在亲和力、免疫原性等方面的能力,而且筛选周期短、操作简单、应用范围广等优势。
总的来说,噬菌体展示技术在极大程度上满足的我们在抗体制备方面的需求。无论是单克隆抗体制备,还是抗体人源化方面,都存在着传统抗体制备方式所不具备的优势。但是也有着不住之处,比如需要以一定的技术实力去攻克建库以及筛选方面的难题,同时还需要具备相应的经济实力。普健生物专业为广大用户提供噬菌体展示服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。