什么是噬菌体文库构建?它的原理是怎样的?

　　噬菌体展示技术在新药研发方面有着广泛的使用，在之前我们和大家聊过有关噬菌体的相关只是，大家可以点击“什么是噬菌体展示技术?它的主要作用有哪些?”去详细了解一下。后来有很多客户问到有关噬菌体展示文库构建方面的知识，有鉴于此，我们在这里统一和大家聊一聊。

　　什么是噬菌体展示文库构建?

　　我们知道，噬菌体展示技术就是通过将外源基因插入到噬菌体蛋白外壳基因的适当位置，让其随着噬菌体的传代，在子代噬菌体表面得到展示，而后通过筛选和淘选的过程后，获得我们所需蛋白的方式。而噬菌体展示文库则是多种不同外源基因噬菌体的集合。

　　如何构建噬菌体展示文库?

　　1、淘选

　　利用靶点抗原或者细胞组织和噬菌体文库作用，淘选出能够和靶点特异性结合或者功能的展示噬菌体，洗脱下来扩增，经过两到五轮淘选，富集和扩增阳性噬菌体文库 。

　　2、筛选

　　对阳性噬菌体文库进行单克隆挑选，通过高通量的测序和功能学实验(ELISA)确定单一的能够和靶点抗原蛋白结合的抗体片段的蛋白序列和基因序列 。

　　噬菌体文库构建的一般流程

　　1、提取所需RNA或mRNA;

　　2、对多色RNA或mRNA进行反转录，获得第一链cDNA;

　　3、通过多个引物，将cDNA库中的轻重链复制并扩增出来;

　　4、在引物上增加酶切位点，再次扩增出cDNA中的轻重链;

　　5、利用技术手段将轻链基因和重链基因拼接到一起;

　　6、将拼接的轻重链整合到噬菌体质粒上;

　　7、扩增建立噬菌体TG1库;

　　8、通过进一步扩增和纯化，获得噬菌体文库;

　　噬菌体文库的质量主要有文库的大小、文库抗体可变区的多样性、基因片段层次分步等方面，所以，我们在判断一个噬菌体文库好坏时，完全可以从这几个方面入手查看。普健生物专业为广大用户提供噬菌体文库构建服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。