盘点昆虫细胞蛋白表达中的一些常见问题

　　对于新手来说，昆虫细胞蛋白表达中常常会遇到各种各样的问题，这些问题在看前辈们做实验的时候完全感觉不到，可是当自己亲自操作的时候，往往就会浮现。那么，昆虫细胞蛋白表达中一般会遇到哪些问题呢?今天普健生物就和大家具体聊聊。

　　1、哪类蛋白适合选择昆虫蛋白表达?

　　对于一些表达相对困难的蛋白都可以考虑用昆虫来表达，比如：激酶、昆虫来源蛋白、糖蛋白、衣壳蛋白、膜蛋白等;

　　2、昆虫蛋白表达是用昆虫吗?

　　昆虫表达并非用昆虫来表达，而是通过培养昆虫细胞，用细胞来表达蛋白;

　　3、目的基因是否整合到昆虫细胞基因中?

　　昆虫表达并不会将目的基因整合到昆虫基因中，而是在特定的条件下，用杆状病毒携带目的基因去侵染昆虫细胞，而后利用宿主的环境进行自我复制，从而获得相应蛋白;

　　4、昆虫蛋白表达是否对蛋白大小有要求?

　　对于大小在10kd-100kd的蛋白适合于任何表达系统，110dk-250kd这类大蛋白则首选昆虫表达系统;

　　5、衣壳蛋白表达后如何纯化?

　　一般来说，衣壳蛋白都较难纯化，主要是因为其可溶性不好、不挂柱、容易形成聚合体等问题。我们通常会采用多种纯化方式来进行综合提纯，这样才能在一定程度上达到纯化的目的;

　　6、目的蛋白表达后会和病毒一起释放出来吗?

　　目的蛋白是否会释放到细胞外主要由蛋白的特性决定，当然了，信号肽也在一定程度上有着一定的影响，一般来说，蛋白都会释放到细胞外。当然了，有一些特殊情况，需要特殊对待;

　　7、如何保存蛋白?

　　一般来说，为了保护其中的病毒，我们需要加入2%培养基级别的BS或胎牛血清，在4度或负80度的环境中保存;

　　事实上能够影响到蛋白特性的因素有很多，而且不同的蛋白所需环境也是各不相同的。所以，我们在进行相关蛋白实验的时候，需要结合实际情况来进行选择。武汉普健生物作为一家专业的蛋白制备公司，专业为广大用户提供昆虫蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。