重组蛋白表达在现代生命科学研究中起着重要的作用,能够为我们在表达量以及表达质量上带来非常大的帮助。通常情况下,重组蛋白是通过将外源基因导入到宿主细胞内,随着细胞蛋白的表达而表达。目前,重组蛋白表达主要通过五大表达系统来实现表达和纯化。
什么是重组蛋白表达?
重组蛋白表达是利用DNA重组技术,将目标基因导入到宿主细胞中,通过宿主的生物机制表达出所需蛋白。通过基因克隆,将基因扩增后形成重组质粒,将质粒导入到宿主细胞中(使用化学方法、电穿孔或者嗜热菌等方法进行转染),而后将细胞进行目的蛋白表达;
重组蛋白表达有哪几种类型呢?
1、融合表达
通过将目的蛋白基因序列构建到表达载体中,由相同的调控原件进行融合表达;
2、非融合表达
这个方法与融合表达相对,所得目的蛋白不与任何蛋白标签进行融合表达,不过这个方法会因为宿主中的蛋白酶而降解,从而失去活性;
3、胞内表达
就重组蛋白表达而言,大多数的目的蛋白都以胞内表达实现,当然了,有些时候,在胞内表达时,会因为细胞内部的原因导致蛋白结构发生影响。这个时候,我们就需要借助分泌信号肽等蛋白标签来实现表达;
4、分泌表达
所谓的分泌表达也就是我们常说的胞外表达,这种表达方式更适合于蛋白的纯化,也比较稳定不易降解;
当然了,就溶解性而言,重组蛋白表达也可以分为可溶性表达和非可溶性表达,也就是我们常说的是否会形成包涵体。虽然说现阶段的重组蛋白表达技术存在着一定的不足之处,但是,其所能带来的好处是不言而喻的。武汉普健生物专业为广大用户提供重组蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。