盘点重组蛋白纯化时常用的几种方法

　　在“重组蛋白之蛋白纯化的原理与步骤”一文中，我们和大家详细介绍了蛋白纯化的相关原理和具体步骤，相信大家对蛋白纯化也有了初步的了解。那么，有关重组蛋白纯化的方法您了解多少呢?今天，普健生物就在这里和大家具体聊聊。

　　我们知道，不同的蛋白在物理、化学、生物活性等方面都有着极大的不同，因为其氨基酸序列和数量的不同，连接氨基酸残基可能是荷正电也可能是荷负电的、极性或是非极性的、亲水或是疏水的。所以，我们完全可以根据它们的这些特点来对其进行相关纯化工作。

　　方法一：超速离心法

　　超速离心法主要用于分离亚细胞和蛋白，利用个例子在梯度液中沉降速度不同的原理，使得不同沉降速度的颗粒处于不同密度的梯度层中，从而达到分离的目的;

　　方法二：选择性沉淀法

　　选择性沉淀法其实就是利用各种沉淀剂或者通过改变某些条件来促使分层沉淀，进而实现蛋白的纯化。

　　常用的方法有盐析沉淀法、有机溶剂沉淀法、水溶性非离子型聚合物沉淀法等方法来实现蛋白纯化操作，具体方式及其优劣我们将在后文中和大家详细介绍;

　　方法三：凝胶层析法

　　凝胶层析法也被称为分子筛过滤法，其实就是利用分子大小的不同，将蛋白分离出来。相比其他方法来说，凝胶沉淀法操作相对温和，对蛋白造成的影响相对要小一些;

　　方法四：离子交换层析法

　　离子交换层析法是利用分子所含电荷的吸附作用不同来实现。我们和大家提到过，蛋白的等电点不同，其所带电荷量也是各不相同的，所以，通过在纤维素上加入电荷位置，从而实现吸附蛋白的效果;

　　方法五：亲和层析法

　　亲和层析法其实就是利用生物大分子的特异性，类似亲和力结合的方式来实现蛋白的吸附;

　　总的来说，上面五种方法所针对的方面不同，其实也是针对各类蛋白在大小、特性等方面的不同来实现蛋白的纯化操作。对于不同的纯化需求来说，五种方法可谓各具优势，需要有选择地进行选择。武汉普健生物专业为广大用户提供重组蛋白纯化服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。