杂交瘤测序的定义及其制备流程-普健生物

　　杂交瘤测序是单克隆抗体制备中常用的一种手段，通过对杂交瘤细胞中的抗体基因序列进行测序，而后记录其结构信息的方式。而后在后续的抗体制备过程中，直接采用这个序列来制备抗体的方式。杂交瘤测序技术对于抗体的特异性和功能性是非常重要的，那么，其具体测序是怎样的呢?今天，普健生物在这里和大家具体聊聊。

　　1、杂交瘤细胞构建。提取免疫后的淋巴B细胞，而后将其与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞;

　　2、细胞筛选。对所得杂交瘤细胞进行培养，而后提取出其中融合成功的杂交瘤细胞(可以通过在其中添加抗生素等方法来实现)，而后对其进行细胞株培养;

　　3、DNA或RNA提取。从筛选所得的细胞株中提取出DNA或RNA;

　　4、扩增。使用聚合酶链反应技术，而后对特定抗体基因片段进行扩增，以便于从复杂的基因组序列中快速扩增出特定序列;

　　5、抗体测序。对所得抗体基因片段进行测序(可以使用传统的测序技术，也可以使用高通量的下一代测序技术);

　　6、序列分析。多所得抗体序列进行分析，识别其中的可变区和常数区，对抗体的特异性和功能性进行进一步分析;

　　通过如上的步骤就能够让我们获得单克隆抗体的序列信息，通过杂交瘤测序，能够为我们后续的研究提供重要的数据支持。总的来说，所得序列可以让我们保持后期抗体制备的特异性和稳定性，能够在最大程度上降低抗体批次之间的差异性。如果您有相关杂交瘤测序的需求，欢迎联系普健生物。