采用杂交瘤技术制备抗体的原理及其具体过程

　　杂交瘤技术也叫做单克隆抗体技术，它是一种在细胞融合技术上发展起来的抗体制备技术。杂交瘤细胞技术通过将骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞相融合，从而形成能够无限增殖且可以生产单克隆抗体的细胞。那么，您对杂交瘤细胞抗体制备技术了解多少呢?今天普健生物在这里和大家具体聊聊。

　　杂交瘤细胞制备的主要步骤：

　　1、细胞的选择与细胞融合

　　特异性抗体制备的一方必须是免疫后的B细胞，通常情况下，我们都会选择面以后的动物脾细胞，因为脾是B细胞的主要汇聚场所，只要发生免疫反应，脾脏中就一定会出现免疫应答。融合细胞的另外一方通常选择骨髓瘤细胞，因为需要其拥有不断繁殖的特性。

　　通常情况下，我们都会选择细胞融合剂来进行细胞的融合，它会对细胞膜造成一定的损伤，也使得细胞更加容易粘连在一起。一般来说，我们会选择聚乙二醇来充当细胞融合剂，在40%的浓度下，其能够最低程度上对细胞造成损伤，同时又能产生最高频的融合;

　　2、细胞培养

　　细胞融合是一个物理过程，在融合的过程中会出现呈现出各种样式，比如脾-瘤细胞、脾-脾细胞、瘤-瘤细胞等。但是，正常的脾细胞在培养基中仅能存活5-7天，细胞多聚体也容易死去，所以，我们仅需将瘤细胞去除即可。而后，在对剩余的细胞进行培养，以获得我们所需细胞;

　　3、特异性抗体筛选

　　因为细胞的融合是一个随机的过程，所以，我们需要有针对性地对其进行筛选清除。一般来说，筛选分为两步：第一步是对融合细胞的抗体进行筛选，第二步是对抗体进行特异性筛选。一般来说，我们可以对融合细胞进行稀释，均匀分为到培养板的每个孔中，培养后取上清液用ELISA法选出高分泌性的细胞(也就是我们常说的克隆)。而后，对这些细胞再次进行克隆化，找出其中阳性细胞株，扩增后再进行冻存、培养等操作;

　　当然了，杂交瘤细胞抗体筛选的过程更加地复杂，而且其中涉及到很多精细化操作，需要专业技术的人员进行操作。而且有很多细节方面的工作需要引起注意，否则，很容易造成杂交瘤细胞融合不成功的现象。普健生物专业为广大用户提供杂交瘤细胞抗体制备服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。