说到重组蛋白表达,相信大家已经不再陌生了,因为在一些药品的使用中会经常使用到。而对于实验室来说,重组蛋白制备实验可以说是非常的常见,而且操作起来也非常的规范。那么,蛋白的制备是不是就非常的简单了呢?其实不然!在日常重组蛋白表达的实验中,我们需要注意如下的一些事项。
1、如何得到可溶性的蛋白
这个问题也是我们蛋白表达过程中最常见的问题之一,虽然说蛋白表达出来了,但是却不溶,导致所得蛋白无法使用。一般这个情况,就是因为我们选择的表达菌株不对,需要更换合适的菌株才行;
2、如何让蛋白产量最大化
主要还是因为温度的缘故。经实验发现,在37度的环境下,蛋白容易出现包涵体,而在30度的时候,可溶性蛋白的产量会提升,15-20度的环境下,诱导性蛋白的产量会达到最大;
3、如何避免包涵体和内毒素的产生
包涵体的产生主要是因为蛋白溶解性达到最大后,导致蛋白析出的情况。所以,这个时候我们不妨换个角度,用无细胞表达系统来试试,通过实验,它不仅能有效避免包涵体、内毒素等物质的产生,而且蛋白表达率也很高;
当然了,重组蛋白表达需要注意的事项并不止我们说的如上几个方面,具体操作中很多细节方面也要引起注意,否则也可能会造成蛋白表达的失败。当然了,按照相关文献给与的方式操作下来,一般都不会出现太大问题,只是因为相关投入与产出难成正比,制备的蛋白无法满足实验需求等问题,可能会对您造成困扰。武汉普健生物专业为广大用户提供重组蛋白制备服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。