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在进行重组蛋白制备的过程中，我们常常会遇到各种各样的问题，因为原料不同、制备环境不同、技术操作不同以及一些不规范的小错误，使得我们所要面对的问题各不相同。当然了，随着技术的不断完善，一些问题得到了良好的解决。但是，因为一些操作，使得很多问题依然存在。今天，普健生物在这里和大家具体聊聊有关重组蛋白纯化过程中出现的沉淀现象的原因及避免方法。
1、镍离子含量过高。在Ni纯化过程中，一部分镍离子会脱落，因为其属于重金属，会和蛋白凝集并产生沉淀;
2、我们搭建的环境不适合蛋白制备，需要重新考虑溶液浓度、PH值、温度等方面的因素;
3、溶液PH值接近蛋白等电点(一般PH值接近等电点时，都容易造成蛋白沉淀);
4、使用反复冻融的蛋白。我们知道，每次冻融都会在一定概率上造成蛋白活性的丢失，反复冻融则会造成这个概率增加;
5、长时间4度保存。长时间将蛋白保持在4度环境下，容易滋生细菌，从而造成蛋白降解和沉淀;
如何避免这些问题呢?
1、当我们用镍柱来纯化蛋白时，适当加入一些EDTA，从而减少重金属反应;
2、重新分析蛋白的最佳制备环境，并保持好相应的制备环境;
3、加入一些辅助性蛋白来保护我们所制备的蛋白产品;
4、尽量减少蛋白的反复冻融，尽量制备出来后就使用掉;
5、短时间保存可考虑4度环境，长期保存还是尽量选择-20度或-80度;
其实大家不难发现，在我们进行重组蛋白制备的时候，很多造成沉淀的情况都是一些小问题所导致，只有将这些细节方面的工作做好了，蛋白纯化工作才能更好地进行。普健生物专业为广大用户提供优质的重组蛋白制备服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。
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