重组蛋白表达时影响蛋白表达结果的因素有哪些?

　　重组蛋白表达和传统的蛋白表达方式有一定的区别，因为其通过基因重组后表达，所以容易造成一些传统表达中不会遇到的问题。虽然说这个问题是一个老生常谈的话题了，但是，其重要程度却不言而喻。那么，哪些因素会影响到重组蛋白表达的结果呢?普健生物在这里和大家具体聊聊。

　　1、载体构建错误

　　其实这是一个新人最常犯的错误，因为弄错读码框，导致蛋白出现不表达的情况。载体的构建可以说是蛋白表达的基础，需要考虑到启动子、克隆位点、终止子、标签等多种因素，只有将这一步做好了，重组蛋白表达才能够进行下去;

　　2、宿主菌选择不当

　　不同的菌种因为其基因型不同，适合于表达的蛋白也是各不相同的。如果选择不当，不仅会造成蛋白表达率低，甚至可能因为内毒素的缘故，造成蛋白性质改变的情况;

　　3、密码子优化不当

　　不同的基因在密码子的使用上有着明显的偏爱性，不同物种在启动子上也是各不相同，所以，一定要结合选择宿主和目的基因的特性来选择合适的启动子;

　　4、mRNA稳定性及结构

　　当mRNA稳定性不足，或者结构发生折叠后，会造成后期反转录时出现问题，自然也就造成了蛋白表达不准确或发生沉淀等现象。一般来说是因为环境因素影响，或者出现了内毒素等问题;

　　5、发生基因突变

　　所需表达的基因序列发生了突变，所表达出来的蛋白已经不是我们所需蛋白了，自然达不到我们的要求了。当然了，其他位置的基因发生突变也可能会造成蛋白不表达或表达率降低的情况;

　　总的来说，重组蛋白表达在表达过程中，很多因素都可能会造成其表达率降低甚至不表达，这个时候，我们就需要通过分析，总结出其问题所在，而后在予以整改，这样才能保证所得蛋白达到我们的预期。当然了，很多时候，可能就是一个小问题，需要有扎实的技术才可以，否则，非常的浪费时间。普健生物专业为广大用户提供重组蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。