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重组蛋白表达之蛋白的生长与诱导

发表时间:2024-01-05 访问次数:459

  在我们使用大肠杆菌表达重组蛋白时,我们需要确定其的产生、定位、培养基以及产量进行确定,以便于其后期简化工作的进行。所以,我们不仅需要对蛋白、培养液等物质进行小规模地分析。对于那些分析出来有利于诱导的条件进行保留,并选择合适的方法对其进行目的蛋白纯化。

  如何对重组蛋白的生长和诱导?

  1、按需求准备pET重组子培养液。直接从经办或甘油保存菌中提取一些细胞加入到抗生素培养液中;

  2、在37度环境下对培养基进行培养。提取3ml培养液,并将其加入到含有抗生素的100ml培养液中;

  3、在摇床上进行无菌培养。在适当温度下降培养基放在摇床上培养2-3小时,在培养过程中要不定期地提取样品进行检测;

  4、分批次培养。在进行诱导之前,需要将培养液分成两份,一份加入IPTG,另一份不加,通过对照,看其具体差异。然后,保持其在适当温度下进行培养;

  总的来说,重组蛋白进行诱导表达时,不仅要测试好相应的培养环境,更是需要进行不同批次的检测和对比,这样才能保证最佳的制备环境。当然了,对于不同的蛋白,需要提供不同的环境,这样才能在更大程度上保证蛋白的表达。武汉普健生物专业为广大用户提供重组蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。