盘点重组蛋白表达过程中常见的几个问题

　　在重组蛋白表达中，很多时候会出现因为一些原因或是误操作导致蛋白表达失败或蛋白性能达不到要求的情况。很多时候是因为一些细节操作方面的问题，有些时候是因为重组蛋白设计方面的问题，那么，到底是因为什么原因导致呢?有鉴于此，普健生物今天在这里和大家具体盘点一下有关重组蛋白表达过程中的一些常见问题。

　　1、蛋白表达水平低

　　重组蛋白表达水平低可以说是重组蛋白系列中最常见的一个问题，因为蛋白人为干预程度较高，无法完全按照传统蛋白表达条件进行表达。引起这个情况的原因很多，比如启动子活性不足、转录过程阻塞、翻译后修饰限制多等等。需要通过优化启动子、培养条件、转化条件、培养时间等多方面进行综合考虑;

　　2、目的蛋白形成包涵体

　　非天然蛋白会出现包涵体的情况也是重组蛋白表达过程中非常常见的问题。当形成包涵体时，我们可以通过优化培养条件、引入辅助蛋白等方式来解决这个问题;

　　3、目标蛋白磷酸化或糖基化不足

　　重组蛋白在表达后常常需要对其进行翻译后修饰的操作(比如糖基化和磷酸化)，但是有的时候因为修饰程度不足，导致蛋白在功能和稳定性方面受到影响。我们可以通过优化培养条件、引入合适的修饰基因以及选择更好的进化系统来解决问题;

　　4、目标蛋白折叠和稳定性方面的问题

　　目的蛋白折叠错误很容易出现蛋白失活或不稳定的现象，这个时候我们需要优化载体构建以及纯化策略的方式来解决问题;

　　5、目标蛋白可溶性问题

　　蛋白不可溶或可溶性低也是重组蛋白表达的常见问题，主要表现在保存时出现聚集和结晶方面的问题。我们可以通过优化纯化条件、使用功能蛋白稳定剂以及使蛋白缓慢结晶的方式来解决这个问题;

　　重组蛋白表达在蛋白功能研究和医药生产方面有着重要的意义，但是也因为其非天然蛋白的缘故，会遇到很多传统蛋白表达所不会遇到的问题，哺乳表达量低、包涵体形成等。这个时候，我们就需要通过优化各种条件来满足其表达的条件，这样才能获得质量更好的蛋白。当然了，各个细节方面的操作也是非常重要的。武汉普健生物专业为广大用户提供重组蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。