当某项技术发展到一定程度后,会诞生多种不同的生产技术,以便于适应各种产品的不同需求。就蛋白纯化来说,就包括溶解、沉淀超滤、吸附等一系列的方法,而且其中的方法中也可以细分出多种不同的方式。今天,我们就和大家具体聊聊有关沉淀法中的几种常用方法。
沉淀法,也叫做溶解度法,是通过改变其在溶液中的溶解度,使得其析出的一种方式,常用的方法如下:
1、盐析法。这个方法在化学中使用非常的频繁,就是通过提升盐度,当盐度达到一定程度后,会使得水活性降低,从而导致蛋白的水溶性降低,最终从水中析出的方式;
2、有机溶剂沉淀法。和盐析法类似,只是将盐换成了有机溶剂(比如甲醇、乙醇、丙酮等),这个方法虽然效果要优于盐析法,但是容易造成蛋白变质,需在低温下操作;
3、蛋白沉淀剂。蛋白沉淀剂的“特异性”较强,它只能和一种或一类蛋白发生反应,使得这类蛋白析出。常见的蛋白沉淀剂有:碱性蛋白、凝集素、重金属等;
4、聚乙二醇沉淀法。聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。
5、选择性沉淀法。利用蛋白在不同物理化学因子环境下稳定性不同的特性,适当的进行选择性沉淀,不仅能使得杂蛋白沉淀,也可以有效提升需求蛋白的纯度;
总的来说,沉淀法的方法比较多,但是不外乎将需求的蛋白析出或是降低溶液中杂蛋白的浓度的方式。这两样方式可谓各具优势也互有不足,需要结合实际情况来进行选择。普健生物作为一家拥有15年蛋白抗体生产经验的公司,专业为您提供蛋白纯化服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。