蛋白提取分离过程中的细胞破碎的详细步骤

　　当我们需要进行细胞内部蛋白提取需求时，我们就需要对蛋白进行破碎操作(有关细胞提取和分离的过程可以在“蛋白纯化之前常用的一些提取和分离方法简介”一问查看)。那么，细胞破碎具体有哪些方法呢?下面普健生物就和大家一一介绍。

　　对于细胞破碎的方法，我们需要提前考虑破碎的目的和独享类型。细胞的类型、大小、形态、生长条件、细胞壁结构以及温度换、PH值等都需要考虑到，综合这些特性，才能找出最合适的方法。因为在破碎的过程中会产生热量，需要提前准备好冷却样品。而且细胞一旦破碎，就会失去代谢调节机制的控制，目的蛋白可能会受到蛋白酶的影响。这个时候我们就需要迅速提取出来，或者加入抑制剂，或通过低温来降低蛋白酶的作用。

　　如下，就是普健生物为大家总结的几种常用的细胞破碎方法及其优缺点。

　　1、超声波法。通过强烈的超声波迅速造成大量细胞破裂，破裂效果非常好，而且所需的样品数量少，使用最为广泛，但是不适合用来进行大规模的细胞破裂，而且对温度控制要求较高;

　　2、高速珠磨法。采用高速珠磨碎细胞，可以快速有效地破裂细胞，但是破碎的条件相对难以掌握;

　　3、高压匀浆法。通过骤然改变细胞的碰撞、压力等方式，来实现细胞的被动破裂，可以用于大规模的操作，使用非常的广泛，但是对于那些与细胞膜结合的蛋白来说，需要进行多次破碎才能实现;

　　4、冻融法。将细胞置于-15度的环境下冷冻，然后再在室温下解冻，通过解冻的过程破碎细胞。这个方法只适合那些细胞壁脆弱的类型，破碎率较低，而且容易造成蛋白失活(通常需要大量的时间);

　　5、酶解法。通过合适的酶来控制细胞的破裂，需要相对温和的条件，而且专一性强，无法实现工业化生产;

　　如上就是普健生物为大家总结的有关细胞破裂的几种操作方法，这些方法都能在一定程度上对细胞进行破裂。但是很多方法只适合实验室使用，无法实现大规模工业化的生产。不过，相信在不久的未来，更多更优质的方法将会被发明出来。普健生物专业为广大用户提供蛋白纯化服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。