在之前的一次实验中,不知道因为什么原因,导致实验结果完全达不到预期。后来通过检测才发现是因为蛋白纯化不够,杂质太多以及蛋白浓度不够,最终导致实验失败。为什么做过蛋白纯化,纯度还达不到实验要求呢?今天普健生物就和大家具体聊聊。
1、在蛋白纯化之前,我们需要对其进行相应的测试,当然了,在进行测试之前,需要对蛋白的相关属性进行了解。比如蛋白的性质、敏感性、溶解度、PH敏感已经环境需求等;
2、蛋白的用途了解。一般来说,如果大量级的蛋白制备需求,则需要考虑到层析柱的尺寸问题,以及所得蛋白浓度问题,是否需要保持活性等等,只有这些方面都了解了,才能更好地制备蛋白;
3、蛋白的检测。不同的方法检测出的蛋白性质是有一定差别的。比如不同组分的蛋白溶液,需要结合其灵敏度、精密性、准确度等方面来综合考虑纯化的步骤,所以,选择的检测方法也需要有所针对性才行;
4、缓冲物。为了提高蛋白的稳定性、减少微生物生长、降低冰点或保持蛋白活性等需求,我们需要添加各种添加剂,比如蛋白酶抑制剂、防腐剂、还原剂等等。这个就需要结合蛋白的需求来考虑添加那种缓冲物;
5、存储条件。在保持活性的前提下,选择合适的温度、合适的PH值、是否冰冻、容器储存等操作;
总的来说,蛋白纯化前,我们需要对蛋白的相关性质进行了解,有针对性地选择纯化方式,过程中需要对其进行相关性质检测,以保证其能达到我们的需求;纯化完成后,需要结合特性对其进行保存,以保证其活性的同时增长其保存时间。普健生物专业为广大用户提供蛋白纯化服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。